外泌体(Exosome)开始被认为是毫无作用的“垃圾”,但随着研究的不断深入,人们发现事实并非如此,外泌体(Exosome)是具有功能活性并可进行细胞间信息传递的微囊泡。外泌体(Exosome)介导瘤细胞的免疫耐受。瘤细胞来源的外泌体(Exosome)本身可作为瘤抗原,因此,瘤来源的外泌体(Exosome)既是一种抗原呈递系统,同时也是瘤排斥抗原的来源。瘤来源的外泌体(Exosome)能够通过传递某些抑制信号,在机体免疫应答过程中起负性调节作用,诱导瘤细胞形成免疫耐受,从而逃避免疫细胞的杀伤。外泌体的异质性可以根据其大小、含量(载物)、对受体细胞的功能影响以及细胞来源来区分。外泌体蛋白提取的方法知乎
微流控芯片是一种可兼容多种外泌体分离方法的新兴检测平台,这些方法包括免疫亲和分离、膜过滤、纳米线捕获、声纳米过滤和确定性侧向位移分选等。微流控装置是由几十到几百微米的不同直径微通道网络组成的紧凑单元,能够处理皮升到微升范围内的黏性介质样品;且根据特定的功能,微通道可以相互连接,使用额外的特定装置来微调流体运动。微流控技术能够以极高的准确性和特异性在微尺度上重现众多实验室过程,取代昂贵的设备,基于微流控技术的电化学外泌体检测芯片已经受到广fan关注。脑脊液提取试剂盒分类随着今后的研究发展,外泌体功能逐步清晰,并扩大临床应用。
液体活检是一种非侵入性的血液检测突破性技术,能早期快速地检测中流及其病灶或者转移过程中释放到血液中的循环中流细胞(circulatingtumorcell,CTC)、循环中流DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)和中流外泌体等中流组分。中流外泌体作为液体活检的一个重要组成,基于其内容物成分多样和稳定等优势,正成为中流标志物相关研究的热点。中流来源纳米大小的外泌体具有易通过血脑屏障、天然的归巢特性、双分子层脂质结构的稳定性和高效的生物相容性等特征。因此,中流外泌体正成为中流靶向zhiliao理想的载体,尤其是工程化外泌体更表现出很好的中流靶向干预和增强药物zhiliao的效果。
利用蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附分析技术可以对外泌体标志性蛋白质进行定性定量分析。其中蛋白免疫印迹是外泌体的经典表征手段之一,操作时往往需要细胞裂解液作为阴性对照。常用的外泌体标志性蛋白质包括四跨膜蛋白质CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡诱导因子6相互作用蛋白(Alix)等,内参蛋白质可以是肌动蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脱氢酶,阴性对照蛋白可以是阻抑素(PHB,线粒体标志蛋白)或钙联结蛋白Calnexin。在酶联免疫吸附析法中,外泌体裂解液通过固载有抗体的固相基质,随后与检测抗体共孵育。两种方法均存在操作繁琐、耗时长的问题,相比较而言,酶联免疫吸附分析法比蛋白质免疫印迹法更加快速,适用于高通量分析。与正常细胞来源外泌体在结构分子上的差异倍受瞩目。
瘤释放的外泌体可以通过削弱免疫效应细胞的反应和激发免疫抑制细胞的扩增,来营造一个免疫抑制的环境。瘤释放的外泌体可以替代瘤细胞接受免疫系统的攻击,从而帮助瘤细胞逃过免疫系统的识别。瘤释放的外泌体可以引发炎症,利用基质浸润细胞的反应营造出利于瘤生长的微环境。研究表明,在过去短短的5年里,对外泌体的研究已经取得了比较好的的进展。如今,收集并分析瘤释放的外泌体已经成为液体活检的一个重要研发方向。靶向瘤释放外泌体的治理策略将对改善病症患者的命运发挥出举足轻重的影响。外泌体是内源性和质膜起源的不同类型的膜囊泡。脑脊液提取试剂盒分类
外泌体由于包含的内容物具有明显的组织特异性,为其能成为瘤早期诊断的生物标志物提供了重要保障。外泌体蛋白提取的方法知乎
Pascucci等将包含有紫杉醇的间充质细胞来源外泌体与胰腺ai细胞共培养,发现装载紫杉醇的间充质细胞外泌体具有很强的抗中流增殖效果。Tian等为降低免疫原性与毒性,采用小鼠未成熟树突状细胞所产生外泌体作为药物载体。同时为实现外泌体运输的靶向性,使细胞表达能够识别乳腺ai细胞的外泌体膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶体相关膜蛋白2)。并采用电穿孔的方法,在纯化所得的小鼠未成熟树突状细胞外泌体中载入阿霉素。结果表明该外泌体能够特异性的将阿霉素传递给中流组织,抑制中流生长且无明显毒性。外泌体蛋白提取的方法知乎