溶化：培养基放入烧杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻璃棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂，培养基不需要加热；如果含有琼脂，则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸，完全溶解后，再补齐所需水，并搅拌均匀。如果配置的培养基量很大，可用不锈钢锅加热溶化，可先用温水加热并随时搅动，防止焦化，如有焦化现象，配制的培养基就不能使用，要重新配制。配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化，因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标，影响实验（培养基中铜含量大于0.3mg/L，细菌不宜生长，铁含量超过0.14mg/L，妨碍细菌产有害）。对容易发生反应，产生沉淀的药品，要分开溶解，较后加入培养基，如磷酸二氢钾和硫酸镁。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。陕西培养基制备器安装调试
培养基配制：素：为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升。植物血凝素（PHA）：非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均被为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。陕西培养基制备器安装调试培养基制备器解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。
液体培养基：为确定液体培养基的生长率，应接种适当的培养物。下面介绍的是用定量、半定量和定性方法评估生长率和选择性的方法。所推荐的这些方法都是通过将液体培养基以倾注或划线方式接种到琼脂平板上培养后，计数或计算液体培养基分数而得出其生长数量的。对于液体培养基定性测试方法，则通过肉眼观察来实现。目标菌和非目标菌的定量稀释法步骤如下：选择液体培养基10mL/管待检。接种目标菌：将少量测试菌株培养物(每管10CFU~100CFU)接种测试肉汤和标准肉汤，混匀。接种非目标菌：将大量测试菌株培养物(每管大于1000CFU)接种测试肉汤和标准肉汤，混匀。
培养基灭菌方法有哪五种类型：1、辐射灭菌原理方法：辐射灭菌原理：是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线，X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法：干热灭菌原理：是采用高温氧化微生物，使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法，化药灭菌原理：使用化药与微生物细胞中的成分发生反应，从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法：过滤灭菌原理：是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气，酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法：在工业生产中，用于灭菌对于培养基，管道和设备，通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间，这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理：是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力，破坏细菌蛋白质和核酸的化学键，使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。培养基制备器开始运行样品量配器并根据培养基的黏度调整样品剂量。
培养基的称量和溶解：小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。注意：培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。全自动培养基制备仪主要特点：保证细菌不被引入容器中。安徽全自动培养基制备器
培养基成份的混合与溶化：培养基所用化学药品均应是化学纯的。陕西培养基制备器安装调试
培养基的质量测试：每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其较终pH。将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基，培养24~48小时，如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。培养基的保存：培养基应存放于冷暗处，较好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周，倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。陕西培养基制备器安装调试
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