局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠脑血管解剖结构与人类相似,大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位,同时,采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu(持续)和短暂性损伤等多种状态,在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势,因此,MCAO是目前*广为接受一种药效模型。神经元尼氏体与细胞核呈蓝紫色,背景呈浅蓝色。结果显示:假手术组海马 CA1 区神经元排列规整,神经元胞体及树突内尼氏体丰富;实验组神经元排列紊乱,并伴有细胞水肿和坏死发生,尼氏体染色较浅,模糊不清;阳性*组神经元尼氏体排列较为规整,偶见神经细胞水肿,和溶解。物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。北京快速制作脑梗MCAO模型课题研究
实验研究的前提是选择合适的实验动物模型:大脑缺血再灌注MCAO疾病模型,创造了一个高度复制人类临床脑血管疾病的动物模型,包括了临床病人的疾病特征,这对于临床研究脑缺血的发病机制和药物筛选非常重要。狒狒和食蟹猕猴的颅神经中枢与人类非常相似,但它们价格昂贵且难以饲养。犬大脑的血管床与人类的明显不同,它有一个广*的颈内动脉和颈外动脉的吻合网络。在兔子中,大脑皮层发育不全,无法提供稳定的病理模型。目前,大鼠是*常用的实验研究动物,因为其饲养成本低,繁殖快。因此,大鼠是目前研究心血管疾病*常用的实验动物之一。在大鼠中建立的大脑缺血再灌注实验动物模型是比较好再现的,因为大鼠的繁殖特点与人类相似,CT中脑组织的病理变化与医院中观察到的临床病人非常相似。上海国内脑梗MCAO模型造模方法MCAO是目前*广为接受一种药效模型。
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。
需要注意的是,虽然转棒实验是一种有效的评估平衡和协调性的方法,但它并不能完全模拟动物在自然环境中的行为。因此,研究人员通常会结合其他实验方法,如行为观察、神经影像学研究等,以更*面地了解脑梗对动物的影响。 此外,对于这种实验方法,也需要考虑动物的福利问题。确保动物在实验过程中受到适当的对待和照顾是非常重要的。因此,研究人员需要遵守严格的动物实验伦理规范,并确保实验过程尽可能地减少动物的痛苦和不适。 总的来说,脑梗模型转棒实验是一种有用的方法,用于评估脑梗对动物平衡和协调性的影响。这种实验方法不仅有助于我们深入理解脑梗的病理生理机制,而且可能为治*方法和康复策略的开发提供重要信息。然而,我们需要充分考虑动物的福利问题,并确保实验过程符合伦理规范。这种模型有助于研究脑梗的发病机制,并寻找新的治*策略。
将小鼠进行呼吸诱导麻醉(异氟烷)后,以仰卧位固定于操作台上,继续维持麻醉,常规消毒,备皮,取颈部正中切口,分离右侧颈部总动脉(CCA)、劲内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA),结扎ECA远心端,在ECA起始端留置结扎线,用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断,将ECA拉至与ICA成一条直线,于结扎线近端用显微剪剪一斜口,将MACO栓线缓缓送入,栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后,单道结扎ECA近心端结扎线,使栓线与血管相对固定,随即松开ICA上的动脉夹,缓慢上提ECA近心端结扎线,将栓线缓慢送入,进线至线栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓线插入40 min后拔出,随后将ECA近心端结扎线结扎,松开CCA近心端动脉夹,碘伏消毒后逐层缝合切口。艾菱菲生物提供定制化的模型,根据客户的特定要求进行设计和构建。周期短,效率高。本地脑梗MCAO模型水迷宫
在实验中,研究人员会观察动物的行为表现,例如运动协调能力、平衡能力等,以评估神经功能缺损的程度。北京快速制作脑梗MCAO模型课题研究
脑梗MCAO模型成功的评判方法 生物化学指标的检测:在实验过程中,检测血清中C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等生物化学指标的变化。这些指标可以反映炎症反应和缺血损伤的程度,有助于评估模型的成功。 病理学检查:实验结束后,对实验动物的大脑进行病理学检查。观察大脑皮质和海马区的细胞形态、排列情况,评估神经细胞的损伤程度。同时,通过免疫组化染色法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,以评估神经元损伤的程度。 行为学评估:在实验过程中,对实验动物进行行为学评估,如Morris水迷宫实验、步态分析等。通过比较不同处理组的行为学表现,评估模型的成功。 综上所述,评判脑梗MCAO模型成功的标准包括脑梗死面积、神经功能缺损评分、梗死血管、生物化学指标、病理学检查和行为学评估等方面。只有当这些指标均符合预期结果时,才能认为模型制备成功。北京快速制作脑梗MCAO模型课题研究