病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q3:细胞核染色过浅,颜色暗淡答:切片在苏木素染液中停留过短,或苏木素过度氧化失效,或分化时间太长。对策:重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液,每个3-5min即可,接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h,自来水冲洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h,自来水冲洗10min染色。Q4:细胞核染色过深,胞浆着蓝色答:切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,一站式生物病理实验外包检测平台。江西靠谱的病理实验外包实验室
病理实验外包,病理染色组织样本保存液多聚甲醛的配置:4%多聚甲醛固定液(4%ParaformaldehydeFixSolution,4%PFAFixSolution)是一种普遍用于免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)、免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、免疫细胞化学(Immunocytochemistry,IC)、流式分析(Fluorescence-activatedcellsorting,FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。织学上,4%的多聚甲醛穿透力强,固定均匀,能使组织硬化,有利于切片。该固定剂造成的组织收缩少,损伤小,较为温和,能很好的保存固有物质,保持组织的抗原性和细微结构。此外,多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂类物质。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。江西靠谱的病理实验外包实验室南京英瀚斯-病理实验外包检测-专业第三方检测机构。
●原因:①组织脱水,透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间过久。●解决方法:①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水,透明渗蜡不够,应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。2.切片皱褶太多且不能完全展开●原因:①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。●解决方法:①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高,可开空调降低室温。②切片刀不干净,可用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。③组织浸蜡不够,可重复浸蜡过程。④将切片刀磨锐利再行切片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍尼氏染色:神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代替粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以只突出尼氏物质,也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。各种神经细胞内都含有尼氏体,但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中,但不在于轴突和胞体的轴丘。尼氏体会因为生理状态的变化而变化,尼氏体是神经元内蛋白质合成的重要部位,当神经元受到刺激后,胞体内的尼氏体会明显减少。通常尼氏体能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。尼氏染色可清晰的显示出尼氏小体定位,判断神经细胞是否受损。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测、细胞实验外包,靠谱专业的实验外包平台。
有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明,中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测|组织检测|科研课题外包|实验外包服务。辽宁专门做病理实验外包哪家靠谱
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病理实验外包,病理染色常见染色介绍普鲁士蓝染色:普鲁士蓝染色(Prussianbluereaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁**钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁**钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁**钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁**物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁**物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。Perlsstain常用于显示局部组织内各种出血***变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。江西靠谱的病理实验外包实验室