1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物!如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!美国Polysciences PEI转染试剂怎么样?北京质粒转染PEI转染试剂试用装
PEIMAX粉末配置方法:1)将1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃烧杯中;2)放入搅拌转子,放置于磁力搅拌器上,设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡;3)等待PEIMAX40K完全溶解,通常需要5分钟左右;4)用25mL塑料移液管加入1N氢氧化钠滴定至pH6.9~7.1;5)如果不小心超过7.1,则使用1N的盐酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1;6)将溶液转移到1L玻璃量筒中,加入水定容至1L;7)用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液;8)按需分装,4°C储存(切记不可冷冻);注:未经配制的粉末有效期为2年。配置成液体后分装在合适的瓶子中,并且保存在4℃的转染试剂将可在6个月之内保持性能。如jin用于蛋白定性研究,分装的转染试剂可延长有效使用期至1年。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!广东商业化PEI转染试剂试用装转染效率好的PEI转染试剂是哪个品牌?
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物!如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!
产品简介:Transporter 5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺(PEI转染试剂)溶液,由PEI MAX配置而成,采用0.1um PES无菌过滤器,完全消除支原体污染风险。Transporter 5将DNA缩聚成带正电荷的复合物,这些复合物很容易通过内吞作用进入细胞,并且Transporter 5-DNA 复合物能很好地抵御溶酶体的降解作用,有效提高转染效率。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究,可无缝过渡到MAXgene GMP用于商业化生产。Transporter 5转染试剂能高效地将DNA转染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆虫(SF9、SF21) 等真核细胞系,可作用于大到135,000个核苷酸的质粒,所以较大的质粒也可以成功地转染。 Transporter 5可节省试剂准备时间,加快项目进度。经过严格的性能检测,确保品质,在新药研发过程中是一款快速、重复性好、可用于批量产的转染试剂。产品特点:非GMP,研究级PEI转染试剂溶液;高转染效率;无缝过渡到MAXgene GMP;易放大,可预测产量;用于工艺开发,临床前和早期临床研究。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!25K和40K的PEI转染试剂有哪些区别?
1、细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2、制备PEI-DNA混合物:以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管,一管将质粒DNA(总量2-8μg为佳)加入240μLHBS中,混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中,轻轻摇动平皿混匀,置于含5%~7%CO2的37℃温箱孵育。注:每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀,保证所取的浓度一致。3、培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基,继续培养,16h左右可以观测到报告基因的表达。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!有哪些不错的PEI转染试剂品牌?质粒转染PEI转染试剂试用装性价比超高
中国地区代理Polysciences PEI转染试剂的是谁?北京质粒转染PEI转染试剂试用装
接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences PEI转染试剂,欢迎咨询曼博生物!想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!北京质粒转染PEI转染试剂试用装
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