糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。糖原染色试剂盒是什么?江苏品质好的糖原染色试剂盒量大从优
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能较好地保存糖原,但有使糖原流动到细胞一侧的现象,多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存,是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此较好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳湖南品牌糖原染色试剂盒销售厂家常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。
糖原染色:1、概况PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。2、原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。3、应用随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加普遍,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究,糖尿病的诊断和研究,用于某些的诊断等~
染色流程相对简便、染液易配制的染色方法;选择染色流程简便的方法,无论对于量较多的整批次染色,还是较少量的染色均能够节省时间、更为便捷。选择染液易配制的方法,对自配染液(尤其是保存较短的染液)是较为重要的选择,不容易造成因染液配制问题而影响染色结果。如显示弹性纤维。醛品红染色法无论是从染色流程,还是染液配制都要比铁苏木精、间苯二酚碱性品红等染色方法要简单方便、省时,同时阳性着染对比度也很明显。特异性高、传统或经典的染色方法;特异、传统/经典的一些染色法在特殊染色方法的选择中往往作为选择。如显示淀粉样物质。在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸。
染色的一般原则:因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照,进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素FITC,EGFP激发光:488nm发射光:525nm;使用面较广,价格便宜。PE激发光488nm发射光575nm,此荧光的激发效率较佳,故此荧光得到的信号较强;检测某些弱表达的抗原,推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm,发射光660nm,在配有双激光的流式细胞仪上,此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。湖南品牌糖原染色试剂盒销售厂家
组织石蜡切片的染色检测。江苏品质好的糖原染色试剂盒量大从优
糖原D-PAS染色液注意事项:1、切片脱蜡应尽量干冷,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前较好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。江苏品质好的糖原染色试剂盒量大从优
注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。浙江糖原...