配制好的培养基保存:灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度,避免长时间保存在灭菌锅内,造成过度灭菌,影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量,应该是在较长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完,应于冷藏保存,如果保存时间超过2天,应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期,应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。全自动培养基制备仪主要特点:无需排干空气。重庆培养基消毒 培养基制备器
培养基防止污染应该注意以下事项:确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自自立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。重庆琼脂灭菌 培养基制备器培养基制备器使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。
消毒与灭菌的区别:消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。
培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。
背景技术:培养基是供微生物、植物、动物组织和细菌生长和维持生长用的人工配置的养料,完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定,一般都是在无菌状态下储存,定量使用的,属于一种高新产业。传统的制备培养基的过程先将培养基粉末进行人工配置,搅匀,然后再装到锥形瓶里边在蒸汽灭菌器里边灭菌再使用,这需要耗费大量的人力物力,而且效率不高。目前,国外进口的培养基制备器,可以将配置、灭菌合二为一,较后恒温保持等待分装。极大地提高了效率,而且节省了人力物力,但是国外的的进口设备价格比较昂贵,因此造成了生产成本的高居不下,在用户的使用范围上造成了一定的局限性。目前国内没有公司生产该的培养基制备器,因此,完成培养基配置、灭菌一体化显得尤为重要。全自动培养基制备分装系统:一键选择培养皿类型;整合数据库,预设培养皿尺寸选择程序。重庆培养基消毒 培养基制备器
培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行PH的初步调正。重庆培养基消毒 培养基制备器
调pH:虽然培养基中含有缓冲物质成分,能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内,但是配出的培养基若不符合要求,就要进行必要的调整。如果有已校准pH计,可用pH计。如果没有,可用精密的pH试纸,再根据需要用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸(微调可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸)调制所需的pH。培养基的pH一般为7.4~7.6,也有酸性或碱性的。用氢氧化钠调整的需要高压灭菌的培养基,在调整pH时要调至高出所需0.1个~0.2个单位,因用氢氧化钠提哦啊正时,高压灭菌后,培养基大的pH要降低0.1~0.2。如培养基中含有碳酸钙成分,可不调pH。重庆培养基消毒 培养基制备器
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