1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物!如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!PEI转染试剂对复合物孵化的时间是有要求的,一般建议5~20分钟之间.商业化PEI转染试剂试用装性价比超高
PEIMAX——高产工业化转染试剂-高度浓缩,可制备大量转染试剂Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。PEI可用作转染试剂,它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成线性聚乙烯亚胺瞬时转染试剂。PEIMAX是一款高度浓缩的粉剂,大量科学家选择PEIMAX,在内部自行制备低成本高效益的PEI转染试剂。多年以来,经过众多业内人士评审的公开研究和出版文献表明,在HEK293、CHO和Sf9系统中可获得很高的转染效率,在重组抗体和病毒载体生产中稳定性高,可靠性强。PEIMAX提供从96孔板到200L生物反应器持续的高基因表达细胞体系,实现从新药研发到工业化生产的轻松过度。而且与大多数细胞转染方案相比,使用PEIMAX至少可降低40%转染成本(部分案例可降低90%转染成本)。高实用性PEI转染试剂试用装适用于293细胞转染哪里有卖GMP等级的PEI转染试剂?
PEIMAX粉末配置方法:1)将1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃烧杯中;2)放入搅拌转子,放置于磁力搅拌器上,设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡;3)等待PEIMAX40K完全溶解,通常需要5分钟左右;4)用25mL塑料移液管加入1N氢氧化钠滴定至pH6.9~7.1;5)如果不小心超过7.1,则使用1N的盐酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1;6)将溶液转移到1L玻璃量筒中,加入水定容至1L;7)用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液;8)按需分装,4°C储存(切记不可冷冻);注:未经配制的粉末有效期为2年。配置成液体后分装在合适的瓶子中,并且保存在4℃的转染试剂将可在6个月之内保持性能。如jin用于蛋白定性研究,分装的转染试剂可延长有效使用期至1年。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!
细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体,以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感。更多Polysciences PEI相关产品内容欢迎咨询上海曼博生物医药科技有限公司!也欢迎关注我们的公众号:Mine-Bio。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!PEI转染试剂的残留检测方法怎么开发呢?
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物!也欢迎关注我们的公众号:Mine-Bio。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!PEI转染试剂是线性的好还是分支的好?高性价比PEI转染试剂试用装能够提供多少
用PEI转染试剂时,一般和DNA的比例是多少?商业化PEI转染试剂试用装性价比超高
注意事项质粒质量:请务必使用高质量转染级无内质粒(推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒)。通过260nm光吸收测定DNA浓度,260nm/280nm比值确定DNA纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内)。如有可能,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件:使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。如想申请PEI试用装,请关注我们的公众号:Mine-bio,回复关键词“PEI申请”,即可参加!商业化PEI转染试剂试用装性价比超高
产品简介:Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,P...
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