外泌体(Exosome),是细胞外囊泡(EV)的一种主要类型,是直径为30至150nm的纳米大小的膜结构,大多数细胞都会分泌外泌体。外泌体存在于各种生物体液中,通过其携带的蛋白质、核酸、脂质和代谢物等来发挥细胞间通讯功能,参与免疫应答、代谢和心血管疾病、神经退行性疾病以及病症进展等多种生理和病理过程。在内体转变为成熟多囊泡内体(MVE)的过程中,内体膜向腔内出芽形成腔内囊泡(ILV),MVE与细胞膜融合释放ILV到细胞外,即形成外泌体。目前,提取外泌体的方法主要有超速离心法、PEG沉淀法。血清外泌体提取试剂盒步骤
外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断,是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡,且有较长的循环半衰期,可用于免疫学相关研究,同时,源自ai细胞的外泌体可以被工程化,发挥免疫刺激作用,可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外,外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中,具有低免疫原性、高耐受性等特点,且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障,因此可用作组织和qi官特异药物输送系统,兼有高输送效率和低副作用。因此,外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质,运送至靶位点后实现靶向zhiliao。血浆血清提取试剂盒价钱外泌体大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均匀内陷,导致流体和固体的总含量不同。
外泌体能携带多种生物活性分子循环于血液/体液中并介导长距离的细胞间通讯,中流来源外泌体富含的蛋白质、核苷酸、脂质等分子能够反映其来源细胞的生理及病理状态,外泌体特殊的脂质双分子层结构能保护其内RNA等分子免于降解,因此,检测中流外泌体成为液体活检一个明显优势。临床试验研究表明,外泌体在多种疾病的早期诊断、疗效和预后监测等方面都具备较好的应用价值,正逐渐成为临床诊疗中新的、理想的生物标志物和可能的靶向药物载体。随着技术的进步,组学时代的到来,大规模蛋白质组学已经被联合应用于筛选和揭示多种ai症细胞外囊泡的标志物。
外泌体(exosomes)是一类由细胞分泌到胞外的囊泡。与其他两种胞外囊泡(微囊泡和凋亡小体)相比,外泌体在产生方式、尺寸、密度和内容物等方面存在明显差异。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌体主要通过胞吐过程释放至细胞外:首先细胞膜向内凹陷形成早期核内体(earlyendosomes),早期核内体进一步内陷形成多泡体(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡体与溶酶体(lysosome)融合,进而降解;另一部分与细胞膜融合,将其内部所包含的囊泡释放至胞外,即为外泌体。外泌体具有独特的物理化学性质,其直径为30~200nm,密度为1.13~1.19g/mL,组成包括细胞来源相关的脂质、蛋白质、RNA、DNA等物质,在其表面连接有大量的糖链,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。外泌体作为核酸分子的药物载体主要用于基因治理。
唾液中包含来自于唾液腺上皮体外细胞的外泌体,Michael等从唾液中提取外泌体,并对唾液外泌体中的miRNA进行分析,发现此类miRNA有望作为成为唾液腺疾病的生物标志物。Wu等成功从汗液中提取得到外泌体,并进行蛋白质组学分析,在汗液外泌体中鉴定到1062种蛋白质,其中包含多种抗jun肽和免疫因子,表明汗液外泌体参与皮肤免疫。Liu等从患有阿尔兹海默症患小鼠的脑脊髓液中提取得到外泌体,并与野生型小鼠进行对比,发现实验组miR-193b明显下调。外泌体观察到它们可以在体内刺激免疫应答。广州血液外泌体
外泌体主要来源于细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。血清外泌体提取试剂盒步骤
外泌体开始被认为是细胞排出代谢废物的一种方式,能够帮助缺乏高效降解能力或位于排泄系统的细胞排出不必要的蛋白质和RNA。近年来,随着人们对外泌体的深入了解,外泌体的多种生物功能先后被发现。如今外泌体作为一种细胞间交流、传递大量的生物功能分子的重要方式日益受到重视。外泌体与受体细胞的信息交流可能通过以下4种途径实现:(1)外泌体表面膜蛋白质被目的细胞表面的受体识别,从而激huo靶细胞;(2)外泌体在蛋白酶作用下产生的表面膜蛋白质碎片可作为目的细胞表面受体的配体;(3)外泌体脂膜可以与目的细胞膜融合,将蛋白质和RNA等内容物释放进去,此类膜融合可能改变靶细胞的一些膜特性,例如脂质和膜蛋白质的密度及种类;(4)目的细胞通过胞吞的形式摄入外泌体。血清外泌体提取试剂盒步骤