1MHEPES缓冲液用注射级水配制,经过无菌过滤,其浓度为238.3g/L。HEPES是一种生物缓冲液,化学性质稳定,对温度和浓度变化不敏感。在pH7.2-7.6范围内,较碳酸氢钠缓冲液的缓冲能力更强。1.产品用途:常用的缓冲体系的一部分,可作为细胞培养基添加组分,维持pH恒定,推荐浓度为10-25nM。HEPES缓冲液在细胞培养过程中起什么作用?HEPES是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌嗪乙硫磺酸,主要作用是防止培养基PH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时,由于培养基脱离了5%二氧化碳的环境,培养液中的二氧化碳迅速逸出,导致PH值迅速升高。若培养液加了HEPES,就可以维持在PH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES.艾伟拓稳定供货注射级HEPES!黑龙江HEPES大批量采购
HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。具体应用方面,如盐酸伊立替康脂质体注射液(Onivyde)。艾伟拓湖南HEPES现货供应注射级,低内***、国产化稳定供应、高性价比注射级HEPES找AVT!
羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)作为一种不易穿过生物膜的缓冲对,可以在稳定脂质体外水相pH为弱碱性的同时,不改变内水相酸性pH,非常适用于伊立替康脂质体。上述内外水相pH差异的问题,在EMA审评报告讨论部分也有体现。EMA审评报告中提到,伊立替康脂质体药物开发的重点是:选择用于活***物负载的比较好抗衡离子选择DSPC与脂质膜的胆固醇成分的比较好比例,这会影响其物理性质和保留活性物质的能力在脂质体中选择脂质体双层的MPEG-2000-DSPE组分,其存在于表面提供空间屏障以避免脂质体聚集选择能够保持比较好pH范围的适当缓冲液输液用浓缩液将缓冲液的选择单列一条,可见其对伊立替康脂质体制剂的重要程度。
各种配制方法总结如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值,***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5MNaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。国内AVT注射用HEPES已登记?
伊立替康**早上市的制剂是盐酸伊立替康注射液,在实际使用的过程中,该剂型逐渐暴露出一个问题:伊立替康的内酯环结构易水解,在pH>6条件下平衡快速向羧酸盐型方向转化。羧酸盐型的伊立替康药理活性低,毒性更强。生理条件(pH 7.4)下,由于血清蛋白优先与羧酸盐络合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的内酯型比例过低,达到平衡时,“低效高毒”的羧酸盐形式化合物所占比重高达90%。
q中包裹的伊立替康以有效的内酯型为主,这也意味着伊立替康脂质体内水相pH偏酸性(pH6左右)。而众多文献及Onivyde专利文件实施例均表明外水相pH在近中性时更有利于脂质的稳定,Onivyde专利文件的实施例表明外水相pH在7.25左右时脂质长期稳定性比较好。这需要伊立替康脂质体外水相和内水相存在pH差异,同时外水相偏碱性的缓冲对不能在长期储存中进入内水相升高内水相pH,否则内水相中的伊立替康将会转化为“低效高毒”的羧酸盐形式。四、不易穿过脂质膜的羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更适用于伊立替康脂质体而羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)作为一种不易穿过生物膜的缓冲对,可以在稳定脂质体外水相pH为弱碱性的同时,不改变内水相酸性pH,非常适用于伊立替康脂质体。 GMP条件下生产艾伟拓稳定供货注射级HEPES。天津药用HEPES现货供应
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注射级HEPES使用方法有两种:(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。需要注意的是,HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L,对细胞无毒性作用。一般情况下,浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,大家根据实际情况正确灵活配制就OK了黑龙江HEPES大批量采购