常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。培养基制备器培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同。北京琼脂灭菌 培养基制备器
什么是细胞培养：细胞培养是指从动物或植物中提取细胞，然后在人工环境中进行培养以进行科学研究。较早的细胞培养技术是在100多年前开发的，为科学的巨大突破做出了贡献。如今，它已成为全世界实验室用于研究细胞的生理学、生物化学、疾病潜在机制以及药物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在药物筛选和大规模制造生物化合物，诸如疫苗和治病性蛋白质。贮存：培养基在30℃下放置1天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。山东不锈钢内桶培养基制备器天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。
培养基的类别按照培养基的成分来分：培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是己知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。(2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
灭菌：分装好的培养基应立即进行灭菌。灭菌的方法种类如下：1.高压蒸汽灭菌法:大多数热培养基都可用此法，小量分装时，用121℃、15min；灭菌量大时，用121℃、30min灭菌；含糖类的培养基只能113℃~115℃、15min灭菌，避免糖类遭破坏。2.煮沸灭菌:对含有不耐高温物质的培养基，可使用此方法。3.过滤除菌:以过滤的方法除菌，用无菌操作技术，定量加入培养基。血液、物品可用无菌操作技术抽取，加入冷却到50℃左右的培养基中。培养基含有不耐热的物质时，可用此法。为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。
培养基的使用：1.琼脂培养基的融化：将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min），以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。培养基制备器内部的管道和容器可以更换，方便移除和清洗。山西自动搅拌培养基制备器
全自动培养基制备仪主要特点：不会产生气泡。北京琼脂灭菌 培养基制备器
天然培养基中血清主要作用：提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。提供和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质（氢化可的松、）、类固醇（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。北京琼脂灭菌 培养基制备器
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【详情】分装：配制好的培养基根据不同的用途分装在三角瓶、试管等容器中，分装试管，如果试管量很大，可用自动分液...
【详情】培养基配制--容器和水：配制培养基所用的容器不得影响培养基质量，一般为玻璃容器，培养基配制所用的容器...
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