紫外可见分光光度计有着较长的历史,其主要理论框架早已建立,制作技术相对成熟。目前,紫外可见分光光度计在追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代紫外可见分光光度计新的增长点。紫外可见分光光度计的发展历史分光光度法始于牛顿。早在1665年牛顿做了一个实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔,在室内形成很细的太阳光束,该光束经棱镜色散后,在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。1815年夫琅和费仔细观察了太阳光谱,发现太阳光谱中有600多条暗线,并且对主要的8条暗线标以A、B、C、D…H的符号。这就是人们Z早知道的吸收光谱线,被称为“夫琅和费线”。但当时对这些线还不能作出正确的解释。1859年本生和基尔霍夫发现由食盐发出的黄色谱线的波长和“夫琅和费线”中的D线波长完全一致,才知一种物质所发射的光波长(或频率),与它所能吸收的波长(或频率)是一致的。1862年密勒应用石英摄谱仪测定了一百多种物质的紫外吸收光谱。他把光谱图表从可见区扩展到了紫外区,并指出:吸收光谱不只与组成物质的基团质有关。接着,哈托莱和贝利等人,又研究了各种溶液对不同波段的截止波长。紫外可见火焰光度计灵敏度高、选择性好、准确度高、适用浓度范围广、分析成本低、操作简便、快速。河南医用火焰光度计厂家供应
分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度,对波长准确度要求允许宽些。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。广西元析仪器火焰光度计供应商杂散光是紫外可见火焰光度计分析误差的主要来源。
点击上方蓝字关注“公众号”分光光度计分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度**常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。清洁仪器我们应该用蘸有中性清洁剂的软布擦拭分光光度计的表面。刺激性的清洁剂可能会损坏仪器表面。你也可以清洁比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或异丙醇的无绒棉签来清洁。这可防止液体进入内部。如果你必须要用水清洁,那么可用蘸有乙醇或异丙醇的棉签来加速干燥。比色皿插槽的盖子也可以清洁,但不是泡在清洁剂中。如有必要,拆下盖子,用蘸有温和清洁剂的软布或无绒棉签来清洁。此外,平时不使用时,应盖上比色皿插槽的盖子,以免灰尘或其他污染物落入。消毒和净化如果分光光度计被微生物所污染,那么可采用下列步骤进行消毒和净化。首先,利用温和的清洁剂来清洁设备。然后,用蘸有消毒剂(通常是酒精溶液)的软布擦拭表面。如有必要,拆下并清洁比色皿插槽。检查组件维护的另一方面在于检查分光光度计的光度准确性。Eppendorf提供了一个滤光片系统(BioSpectrometerreferencefilterkit),以评估光度准确性和系统的波长误差。
5、WFZ800-DA、756型等分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6、放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下:分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。典型故障及其排除方法1、仪器不能调零。可能原因:a.光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。b.透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮。c.仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥。安装紫外-可见火焰光度计应满足温湿度要求。
光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。检验波长准确度较简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收峰值,如果,测出的值与滤光片标准值之差超出规程规定,则需要进行波长调节。用透射比标准值分别为10%、20%、30%左右的光谱中性滤光片,可见光区分别在440、546、635nm波长处,以空气为参比,分别测量各滤光片的透射比,紫外光区用重铬酸钾溶液分别在235、257、313、350nm波长处,以高氯酸溶液为参比,测量其透射比。紫外可见火焰光度计就是利用紫外分光光度法来进行分析物质的专业仪器。福建元析火焰光度计型号
火焰光度计有时也称为火焰光谱仪。河南医用火焰光度计厂家供应
杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光,随着样品浓度的增加,杂散光的影响也随之增大,将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱,杂散光的影响更不能忽视。因此,杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。河南医用火焰光度计厂家供应
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