四川浓缩超滤离心管咨询

离心管就是一个简单的可以承受高转速压力的管子，比如离一些样品，分离出上清沉淀。 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，目前较常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了，分子量比它大的就截留在上面(即内管中)，就是超滤的原理。超滤离心管的选择主要看你要截留那部分物质，就选择比较小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去(这是由制造工艺决定的)。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。使用超滤离心管时应注意避免过度压力造成膜破裂或损坏并影响分离效果。四川浓缩超滤离心管咨询

我用的是3500g，4度离心，时间可以自己控制，取决于你之后的浓缩体积，我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长，不同的蛋白浓缩的速度不同，有的需要长时间离心，有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯，所用的是什么buffer，还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度，不要一下子浓缩过了，甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用，所以如果想重复使用，不要离得速度太高，4000－4500RPM就差不多了，另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹，现在的管子好像不如从前的结实了。重庆浓缩超滤离心管能干什么使用超滤离心管时应注意遵循正确的操作流程和实验室规范，并定期进行质量控制和评估。

超滤离心管使用方法和注意事项：1、选择合适的超滤离心管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤离心管需要插在冰上预冷。3、质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法*时间处理，后果不可预测！

超滤是大分子脱盐、浓缩较方便的方法，重复性好，得率有保障，已经在蛋白、抗体、病毒、核酸、囊泡等样品制备中建立标准操作；在目前大热的外泌体制备中也已经成为主流方法。超滤管采用离心方式快速处理样品，是很多科研小伙伴们每天要用到的基本装备。但是，在默克生命科学团队推出超滤管中文说明书(AU0.5/4/15)之前，我们发现近90%的使用者在选择和使用过程中因为缺乏必要信息而没有获得较佳体验，更重要的是，宝贵的样本会遭受本可避免的损失！如果目的蛋白是120kDa，请问应该选择的超滤管规格是100k，50k，还是30k甚至10k？你采用的是1/2，1/3抑或1/6算法？这些没有统一的说法，是因为不同厂家的膜的截留分子量的定义不同。使用超滤离心管时要注意控制转速，以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。

离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备，生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小颗粒（如细胞器、生物大分子的沉淀等） 以一定的速度沉降，从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失，大多数情况下，在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率，因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上，蒸馏水彻底冲洗柱子，再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用，需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。超滤离心管可以用于提取动植物组织中的酶、元素等生物活性分子，以进行进一步的生化学和医学研究。杭州超滤离心管使用方法

超滤离心管是一个快速、便捷的方法来从混合物中分离和提取大分子，如蛋白质、核酸等。四川浓缩超滤离心管咨询

超滤作为一种膜分离技术，普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换，其原理是溶液在力的作用下，通过超滤膜孔径的筛滤，大分子量的颗粒被截留下来，而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜，从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的，这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效，可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上，较大样本量为15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时，将薄膜面板朝上定位，较大旋转 5000 xg，旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质，在过滤装置的底部插入一个移液管，通过左右扫动的方式将样品抽离，以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明：为达到较佳回收率，离心后应立即取出浓缩样品。四川浓缩超滤离心管咨询

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