培养基的实验室制备：①概述：培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如，含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感，应在煮沸后快速冷却，避光保存。同样，一些试剂则不需要灭菌，直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明）。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL，要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注：大容量培养基（＞1000mL）灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却，防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基（如含亮绿的培养基）是非常重要的。制备培养基的操作要点：半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。吉林全自动培养基制备器
培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。江西全自动培养基制备器固体培养基根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。
培养基各成份的混合和溶化：培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，较后必须加以补足。
灭菌：分装好的培养基应立即进行灭菌。灭菌的方法种类如下：1.高压蒸汽灭菌法:大多数热培养基都可用此法，小量分装时，用121℃、15min；灭菌量大时，用121℃、30min灭菌；含糖类的培养基只能113℃~115℃、15min灭菌，避免糖类遭破坏。2.煮沸灭菌:对含有不耐高温物质的培养基，可使用此方法。3.过滤除菌:以过滤的方法除菌，用无菌操作技术，定量加入培养基。血液、物品可用无菌操作技术抽取，加入冷却到50℃左右的培养基中。培养基含有不耐热的物质时，可用此法。在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。
培养基制备的基本方法和注意事项:１、培养基配方的选定:同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。２、培养基的制备记录:每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，较终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。吉林大容量 培养基制备器
干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。吉林全自动培养基制备器
简单制作培养基，需要完成以下几个主要步骤：简单制作培养基，必须将其过滤并澄清液体介质必须完全澄清，普通液体介质可用滤纸过滤，滤纸应折成折扇状或漏斗状，以免滤纸因水力不均而破裂。当温度较高时，培养基可以用干净的白天鹅绒过滤。新制肉、肝、血、马铃薯等滤液，必须用丝绒布过滤，再用滤纸一次又一次地过滤。若过滤方法不能满足澄清的要求，则应采用蛋清过滤。需要对介质分类处理，按培养基及试管内其它烧瓶使用的容器、用途分为适当。货运量超过每2个集装箱3个容量包装的要求。封堵也是容器外包，可用防水防潮纸塞纸封堵容器内棉。电动式装配机采用定量很好的重用或半自动解。预处理和预处理对灭菌容器的清洗要干燥，灭菌时要彻底，培养基要干燥。一只小玻璃瓶批培养基被检测出，培养基被一批pH批作为该值基准时，应被分成20mL的培养基进行消毒处理。吉林全自动培养基制备器
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