福建外泌体miRNA芯片

外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200nm，形态也呈现出多样性。长链非编码RNA（longnon-codingRNA）是一类转录本长度超过200nt、不编码蛋白的RNA。近年来的研究表明lncRNA能在标贯遗传、转录及转录后水平上调控基因表达，参与了X染色体沉默、基因组印记以及染色质修饰、转录jihuo、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程，与人类疾病的发生、发展和防治都有着密切联系。lncRNA芯片对lncRNA进行功能研究也被更多的关注，通过设计不同的lncRNA探针，可以更加快速、高通量地筛选出疾病或特定生物学过程中差异表达的lncRNA和mRNA信息，找到lncRNA的靶基因位点深入分析调控机制。外泌体的异质性可以根据其大小、含量(载物)、对受体细胞的功能影响以及细胞来源来区分。福建外泌体miRNA芯片

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍，通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后，10000xg离心1h，可将直径在30-150nm之间，且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体，为了进一步纯化胎盘相关外泌体，将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后，加入非线性蔗糖密度梯度层，10000xg超速离心5h，将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证，确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。湖南外泌体Dil外泌体是一种由活细胞分泌的，直径约为40～160nm的具有双层膜结构的生物活性囊泡。

卵巢ai患者与良性卵巢疾病患者血清外泌体中的miRNA表达谱有明显差异，表明血清外泌体中的miRNA可以作为卵巢ai活检的替代诊断标志物。多项研究表明外泌体中的miR-21在包括大多数ai症的多种病理条件下过度表达。尿液外泌体来源于泌尿系统相关的各种细胞，包括肾小球足细胞、肾小管细胞和膀胱等，因此尿液外泌体数目、形态和生化性质的改变往往反映泌尿系统疾病。通过对前列腺ai症患者尿液中的外泌体进行转录组分析，鉴定到两种已知的前列腺ai症标志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3，前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG，跨膜蛋白酶丝氨酸与ERG的融合基因)，表明尿液外泌体具有诊断和监测ai症患者状态的潜力。

由于这些胞外囊泡（EV）与生理和病理状况之间的关系，人们对EV的兴趣呈指数增长。EVs对新型诊断和临床转化有很大希望。近的研究已经将这些交流所需的一些任务归结为细胞外囊泡（如外泌体和微泡），主要参与髓鞘胶质细胞和神经元之间的相互信号传递从而促进神经元存活、由小胶质细胞介导的免疫应答、突触组装和可塑性。这种囊泡也被认为是神经变性疾病和脑病扩散的重要因素。这些细胞外囊泡功能为以前无法识别的神经系统内跨细胞相互作用增加了新方式。细胞表面受体表达不同，外泌体对受体细胞的影响可能不同，可能诱导细胞存活，也可能诱导凋亡或免疫调节等。

在Rameshwar等的研究中，采用转染间充质干细胞的方法，使外泌体载有anti-miR-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miR-9传递的实验时，发现两种细胞不仅可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miR-9。且anti-miR-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miR-9实现，而非经GJIC传递的anti-miR-9，显示出外泌体在运载miRNA进行基因zhiliao时的潜力。利用外泌体进行GBM的zhiliao不只停留在体外细胞实验上，也已经有相关的体内zhiliao报道。外泌体在心脏修复中起着关键作用。福建外泌体miRNA芯片

外泌体研究使用血浆样本进行实验较好。福建外泌体miRNA芯片

建立记录各论文实验条件的数据库也可作为规避混乱的方法之一。一方面，随着EV研究倍受世界瞩目，各国启动了大型研究项目。美国启动NIH战略性大型项目（ExtracellularRNACommunication），国际厉害性学会——Gordon和KeystoneSymposia也从2016开始成立会议小组。受到欧洲药物研究开发公司“创新药物倡议组织（IMI）”的支持推进的CANCER-ID项目，也包含EV研究在内。2017年日本选定了EV研究为文部科学省研究开发战略的目标之一，期待会加速今后的研究发展。无论如何，今后EV研究的根本就是必须有强有力的研究方法和技术，而PS亲和法有望成为其中之一。福建外泌体miRNA芯片

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