培养基防止污染应该注意以下事项:确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自自立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。天津培养基制备仪售后
培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,培养基要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的保存期限以厂家提供为准,培养基开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并尽快用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、一次开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。湖南进口培养基制备仪脱水培养基,又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。
培养基的类别按照培养基的成分来分:培养基按其所含成分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是己知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,但价格较贵,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,所以常被采用。(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
培养基制备器:主要应用于液体培养基及微生物培养基的培养基制备器。高效的加热和冷却,良好的加热元件能确保快速加热。培养基容器外壁的水循环能保证快速冷却。通过热交换器不断地将热的去离子水冷却。总循环时间为60至120分钟,包括加热、灭菌和冷却,具体时间取决于容器的大小,培养基的量和冷却水的温度。无菌过滤的支持压力可以防止培养基发泡或溢沸。触摸屏技术,新使灭菌器操作起来有了更多的选择,增加了灵活性。加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基。
培养基pH值不在标准范围内的问题:出现此类情况有很多原因,生物大致分为①厂家质量:出厂时pH不稳定。②灭菌问题:是蒸压过高或杀菌时间过长,导致葡萄糖焦化,因此,pH值降低。③存放周期:保存时间超过保质期或结块水的质量有问题。④水质问题:采用去离子水/蒸馏水/纯净水等,不要采用矿泉水和自来水。⑤存储温度:储存温度过高。⑥光线直射等六种原因,可逐一检查排除解决问题。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。湖南进口培养基制备仪
有的培养基还含有素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。天津培养基制备仪售后
马铃薯培养基的分装:1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5,灭菌后须趁热放置成斜面,斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3,灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3,灭菌后趁热直立,待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中,约是试管长度的1/3。6.琼脂平板:将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右,以无菌手续倾人灭菌平皿内,内径225px的平皿倾注培养基约13~15ml,轻摇平皿底,使培养基平铺于平皿底部,待凝固后即成,倾注培养基时,切勿将皿盖全部启开,以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板),表面水分较多,不利于细菌的分离,通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。天津培养基制备仪售后
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