外泌体摄取

在当代准确医疗的大趋势下，外泌体的发现和研究为肺病的早期诊断和医治提供了崭新的方向。外泌体在液体活检中的巨大潜力可以为肺病患者的早期发现和早期诊疗提供可靠依据。根据种瘤来源的外泌体在肺病的发发展和侵袭转移过程中的作用及相关机制的研究，临床医疗人员可以针对不同的患者制定合适的医治方案，以达到改善肺病患者生存率，延长肺病患者生存时间的目的。但是，针对外泌体的研究还存在诸多的问题有待广大研究者解决，如：外泌体的纯化及标记方法、如何寻找外泌体的靶基因、外泌体的作用机制及信号通路等。总而言之，外泌体的研究有着广阔的前景，基于外泌体与肺病的研究，有望研发出能够应用于肺病临床诊断和医治的有效措施，造福更多的患者。外泌体是一种存在于细胞外的多囊泡体，通过细胞内吞泡膜向内凹陷形成。外泌体摄取

近年来，生物医学领域上，干细胞在防病抗病、延缓衰老、组织再生等方面发挥着巨大的潜力，成为人们关注的热点。随着研究的不断深入，新的风口再次出现，它那就是——外泌体。外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)。现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。外泌体中含有丰富的蛋白质和遗传物质DNA以及RNA等。它的存在，就像是生物界的邮差，可以在细胞间运输和转移生物活性分子，是细胞间通讯交流的载体。上海宇玫博生物科技有限公司。外泌体摄取细胞分泌到细胞外环境中分别称为外泌体和微泡的细胞外膜泡。

唾液中包含来自于唾液腺上皮体外细胞的外泌体，Michael等从唾液中提取外泌体，并对唾液外泌体中的miRNA进行分析，发现此类miRNA有望作为成为唾液腺疾病的生物标志物。Wu等成功从汗液中提取得到外泌体，并进行蛋白质组学分析，在汗液外泌体中鉴定到1062种蛋白质，其中包含多种抗jun肽和免疫因子，表明汗液外泌体参与皮肤免疫。Liu等从患有阿尔兹海默症患小鼠的脑脊髓液中提取得到外泌体，并与野生型小鼠进行对比，发现实验组miR-193b明显下调。

除运输药物进行疾病zhiliao之外，外泌体还能进行免疫zhiliao，外泌体免疫zhiliao和载药zhiliao。进行免疫调节时，外泌体通常运载TGF-β1、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物质。在这些研究中，分泌外泌体的母代细胞往往选用具有很好抗原递呈(antigenpresentation)能力的树突细胞或者中流细胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤细胞作为母代细胞，通过热处理的方式使淋巴瘤细胞分泌的外泌体含有更多的热休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子，如主要组织相容性复合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等，与未热处理的鼠B淋巴瘤细胞分泌的外泌体相比，热处理后分泌的外泌体可以增强对T细胞的激huo能力，从而增强这种基于外泌体的疫苗的抗中流能力。外泌体内容物的进入或外泌体信号的诱导可能涉及配体受体诱导的细胞内信号或融合。

结果表明，PS亲和法可以检测到许多目前为止都无法检测的外泌体蛋白质和RNA。应用Tim4的外泌体强结合能力，可用ELISA或FACS高灵敏度定性检测、定量分析外泌体。以前无法用超速离心法提取的微囊泡，也通过运用PS亲和法实现高纯度提取。本指导书中对该技术进行详细说明，这项技术的有用性今后将受到世界各方评价，有望在外泌体和微囊泡生理功能的分析研究上起重大贡献。外泌体的检测和提取还遇到一个困难即：对各种外泌体的分类。研究人员尚未统一定义以何种方法提取的细胞外囊泡可以称之为外泌体，给实验数据的分析和重复性确认带来困难。近年，随着国际细胞外囊泡协会的成立、世界性研究者研讨会的举办，提案MISEV指南作为国际标准，计划或已经开始进行EV研究的科学家请务必阅读这些方针。外泌体普遍参与细胞间物质运输与信息传递，调控细胞生理活动。外泌体摄取

外泌体为细胞疗法中的不同合成分子和生物分子的递送提供了广阔的前景和崭新的诊疗领域。外泌体摄取

为了解决外泌体实验遇到的上述的各种问题,Wako研发出MagCapture™外泌体提取试剂盒PS（MagCapture™ExosomeIsolationKitPS）提取高纯度细胞外囊泡。外泌体膜含有分泌细胞源的蛋白和脂质，众所周知磷脂酰丝氨酸（PS）在活细胞通过翻转酶作用导向细胞膜内侧，暴露在外泌体膜外侧3）。另外，T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4（Tim4通过巨噬细胞进行细胞凋亡的吞噬受体）蛋白通过细胞外域IgV域与含有钙离子的PS结合4）。基于上述知识，我们利用Tim4固化磁珠，在钙离子存在下捕捉培养上清和血清等样品中的外泌体，再添加螯合剂洗脱外泌体，这种外泌体纯化方法是和金泽大学医学系免疫学华山教授共同开发，并取得了成功。5）这是迄今为止取代黄金标准超速离心法的新型外泌体纯化方法。外泌体摄取

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