研究思路:作者首先分离了小鼠脑组织,提取脑周质外泌体,通过外泌体全转录组测序检测TBI脑周组织外泌体中环状RNA的表达变化。结果发现231个差异表达的环状RNA,其中155个上调,76个下调。接下来通过生信分析如GO及KEGG分析对外泌体差异表达的环状RNA进行了功能预测。GO分析表明这些RNA分子主要参与神经损伤修复,神经系统发育及神经信号传导相关,这些分子同时主要富集在cGMP-PKG信号通路。CircRNA-miRNA互作网络图揭示了环状RNA作用靶miRNA及可能的功能。本文first研究了大脑创伤外泌体中环状RNA变化,为后续分子机理详细研究提供诸多靶分子,也为大脑创伤的干预医治提供潜在的靶点。circRNA的类型比想象的要复杂,可以来自基因组上多种基因结构。外泌体环状
1.环状RNA为什么火?它到底是何方神圣?2013年两篇Nature[1][2]文章的出世,彻底颠覆了我们对RNA的传统认知,同时也迅速轰动了整个生物医学界!经过严格统计汇总后,2017年国家自然科学金获批的项目中环状RNA研究相关的项目总数高达176项,其中有两项杰出青年基金,一项youxiu青年基金,两项重点项目,94项面上项目,62项青年基金项目,15项地区科学基金项目。比如中医学和药理学方向,相信未来其他类型的tumour和学科方向必定会争取更多的环状RNA课题资助。与此同时,生命科学方向环状RNA研究显得略微低调些,广东研究环状环状 RNA 呈封闭环状结构,在生物体中稳定存在。
云序专注于环状RNA研究,前期环状RNA筛选,云序提供全转录组及环状RNA测序相关服务;环状RNA验证,云序提供qPCR,RNaseR及Sanger测序等服务;文中环状RNA机制研究金钥匙——环状RNAPullDown及RIP环状RNA测序,云序均可提供全套服务!新年伊始,云序客户更是在环状RNA领域接连发表高分文章,包括世界首篇小鼠大脑创伤外泌体环状RNA文章;世界首篇非洲爪蟾环状RNA文章以及世界首篇红斑狼疮性肾炎环状RNA文章等等。云序致力于帮助客户在环状RNA研究领域占得先机,拔得头筹!
从环状RNA结合功能蛋白角度,成功的向我们展示了核内circRNA具有重要生理功能,以及该类型circRNA的研究方法。首先通过高通量测序筛选与造血干细胞干性维持相关的circRNA分子,围绕该分子设计一系列体内、体外干扰实验,确定其可引起干细胞干性维持相关细胞表型改变。后续,与circRNA海绵机制研究类似,RNAPullDown实验及RIP实验成为机制研究成功与否的关键钥匙。作者基于RNAPull-down技术筛选到可能与Cia-cGAS相互作用的蛋白质,并进一步通过RIP实验反向验证。2006年在果蝇中发现来自于Muscleblind的未知环状转录本。
样本要求样品类型:组织、细胞、体液或总RNA样品。其它类型样品请详询。样品量:a)细胞:2×106b)组织:50mgc)体液:全血、血清、血浆2-3ml脑脊液:5ml尿液:50mld)总RNA:2μg(OD260/280≥1.8;OD260/230≥1.5无明显降解,电泳检测样品特征性条带完整清晰,无明显弥散或拖尾)样品运输及保存:样品运输:样品置于1.5mL管中,封口膜封好,干冰运输。样品保存:细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理,液氮冻存后-80℃保存;血液样品应使用EDTA抗凝,不可用肝素;RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存,避免反复冻融。m5C环状RNA测序,是近年来发现的一类在tRNA及rRNA高丰度存在的甲基化修饰。山西环状平台
CircRNA由称为“反向剪接”的非经典剪接事件产生。外泌体环状
为了更全检测小麦中所有环状RNA的表达情况,研究人员分别对PEG和水处理后的小麦幼苗叶子进行环状RNA测序,共发现了88条环状RNA。通过对环状RNA的基因组来源进行分析,发现环状RNA可分为5类,其中基因间(intragenic)产生的环状RNA占大多数。接下来,研究人员系统分析了不同样本之间环状RNA的表达情况,发现62条环状RNA差异表达,这暗示着这些环状RNA可能在脱水应激中发挥作用。为了验证测序结果的准确性,研究人员挑选了16条环状RNA,利用“divergentprimers”进行环状RNA定量PCR检测。外泌体环状
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