提取试剂盒应用

细胞摄取诊疗性外泌体：从树突状细胞、成纤维细胞和间充质细胞中分离出的诊疗性外泌体可对靶细胞产生特定的作用，包括新抗原呈递、免疫调节和药物有效载荷传递。诊疗性外泌体对靶细胞的影响可能是通过不同的进入或相互作用机制来控制的。完整的外泌体的进入可能包括受体介导的内吞作用、网格蛋白包被小凹、脂筏、吞噬作用、小凹和大胞饮作用。外泌体内容物的进入或外泌体信号的诱导可能涉及配体受体诱导的细胞内信号或融合，从而将外泌体内容物沉积到细胞质中。近年来，随着外泌体研究的不断深入，它的应用已经涉及医学基础和免疫领域、寄生虫领域。外泌体就像是生物界的邮差，可以在细胞间运输和转移生物活性分子，是细胞间通讯交流的载体。提取试剂盒应用

酶联免疫吸附测定（ELISA）：将其中一种针对外泌体表面抗原的抗体固定在微孔板的表面上，将外泌体样品暴露于含有固定抗体的孔中，由于抗体-抗原相互作用，表达抗原的外泌体将被捕获固定在板上。将未捕获的样品内容物洗掉，并使用另一种抗体检测固定的外泌体。ELISA已用于从尿液、血浆和血清中分离出外泌体，当使用标准液（已知外泌体的量）创建标准曲线时，甚至可以进行定量。但是，此方法需要通过超速离心或超滤对样品进行预处理。同样，流场-流分离与紫外线分析仪和光散射检测器相结合已被用于分析外泌体的大小和纯度。外泌体属于胞外囊泡类，除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡。成都腹水外泌体在抗原呈递细胞中的外泌体发挥作用的报道后，人们对外泌体的兴趣增强。

外泌体即细胞分泌的直径约40-100nm的微小膜泡，多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。一开始被当做细胞排泄物，但是近几年，研究发现外泌体可谓是小身体大作用。种瘤发生转移后，如何靶向呈递药物一直是种瘤医治中的一个巨大挑战。发表于NanoLett的一项研究中，研究人员利用外泌体制备药物的递送系统（LD-MDS），并取得成功。在这项研究中，研究人员将相关药物锚定在活巨噬细胞膜上，细胞自身相关蛋白酶响应开启并将药物转载进入外泌体，顺利递送至肺转移灶并且转化为纳米囊泡和次级纳米囊泡，促进转移性4T1病细胞的有效内化和细胞死亡。之后，受损的4T1病细胞可以释放次级纳米囊泡和游离药物分子，再破坏邻近的病细胞。研究显示，LD-MDS对体内直径小于100μm的肺转移病灶显示出优异的靶向效率，并显着压制肺转移。

外泌体的提取分离方法：1、超滤离心：由于外泌体是一个大小约几十纳米的囊状小体，大于一般蛋白质，利用不同截留相对分子质量(MWCO)的超滤膜对样品进行选择性分离，便可获得外泌体。超滤离心法简单高效，且不影响外泌体的生物活性，是提取细胞外泌体的一种新方法。2、磁珠免疫法：外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。外泌体给后续实验产生了许多障碍。

外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，较后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。源自于间充质干细胞内分泌的外泌体，富含一百多种胞外基质蛋白，mRNA信使核糖核酸和多重生长因子。在临床上，干细胞外泌体主要治理烧伤、烫伤、皮肤溃疡，再生健康皮肤；在护肤方面，主要是对外伤受损、衰老中毒皮肤进行修复，比较全的调理皮肤、改善肤质，令肌肤恢复年轻、健康的状态。外泌体是内源性和质膜起源的不同类型的膜囊泡。研究所外泌体提取试剂盒成分

外泌体膜蛋白可以与靶细胞膜蛋白结合，进而唤醒靶细胞细胞内的信号通路。提取试剂盒应用

Pascucci等将包含有紫杉醇的间充质细胞来源外泌体与胰腺ai细胞共培养，发现装载紫杉醇的间充质细胞外泌体具有很强的抗中流增殖效果。Tian等为降低免疫原性与毒性，采用小鼠未成熟树突状细胞所产生外泌体作为药物载体。同时为实现外泌体运输的靶向性，使细胞表达能够识别乳腺ai细胞的外泌体膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b，溶酶体相关膜蛋白2)。并采用电穿孔的方法，在纯化所得的小鼠未成熟树突状细胞外泌体中载入阿霉素。结果表明该外泌体能够特异性的将阿霉素传递给中流组织，抑制中流生长且无明显毒性。提取试剂盒应用

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