培养基pH值不在标准范围内的问题：出现此类情况有很多原因，生物大致分为①厂家质量：出厂时pH不稳定。②灭菌问题：是蒸压过高或杀菌时间过长，导致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存时间超过保质期或结块水的质量有问题。④水质问题：采用去离子水/蒸馏水/纯净水等，不要采用矿泉水和自来水。⑤存储温度：储存温度过高。⑥光线直射等六种原因，可逐一检查排除解决问题。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐，调节pH7.2～7.6，经灭菌处理后，即为基础液体培养基。山西Systec培养基制备仪
培养基的脱气：必要时，在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子；加热后盖紧盖子，并迅速冷却至使用温度。3.添加成分的加入：对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。4.培养基的弃置：所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。甘肃琼脂培养基制备仪培养基中营养物质的浓度过大，会使渗透压过高，使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。
培养基制备的基本方法：1.培养基配方的选定：同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对。2、培养基的制备记录，每次制备培养基均应有记录，包括培养推各称，配方及其来源．和各种成份的牌号。较终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等，记录应复制一份。3.培养基成分的称取。培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱．较好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。5、培养塞pH的初步调整培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调正。
培养基防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自自立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。
含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题：在此种情况下，建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大，在冷却过程中容易沉淀到底，造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程，因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂；不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，颜色越深；研磨时间越长，颜色越深等三个原因。培养基一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。湖北不锈钢内桶培养基制备仪
有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。山西Systec培养基制备仪
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