北京技术外泌体文章

超过4600种蛋白质与外泌体有关。外泌体蛋白有以下几类：①外泌体中常见的蛋白质多与其生物发生机制有关，外泌体含有的细胞质蛋白，如膜蛋白和RAB蛋白，可以促进MVBs与细胞膜的融合及外泌体的释放；Tsg-101及附属蛋白质Alix参与ESCRT过程，促进内体膜的凹陷。②外泌体含有参与抗原呈递的蛋白质，如CD1、MHCⅠ和MHCⅡ，其在免疫调节中发挥重要作用，MHCⅠ还参与向T细胞呈递抗原的生理过程。外泌体表面还存在热休克蛋白，如HSP70和HSP90，促进了抗原肽与MHCⅠ及MHCⅡ的结合。③外泌体含有信号转导蛋白，如G蛋白和蛋白激酶。④外泌体含有丰富的蛋白水解酶，这表明外泌体能够促进细胞转移。⑤外泌体中还含有细胞质微管蛋白、肌动蛋白和肌动蛋白结合蛋白。但目前未发现外泌体中含有与内质网、高尔基体和细胞核相关的蛋白质。近年来,研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体。北京技术外泌体文章

奥沙利铂耐药性是结直肠ai医治中的一大挑战，调节性T细胞（Treg）的免疫抑制作用可能在其中发挥作用。另外，外泌体中的miRNA可能作为预测化疗敏感性的潜在生物标志物。天津医科大学的巴一团队及应国光团队在MolecularTherapy上发表的一项较新研究，发现结直肠ai细胞通过外泌体分泌的miR-208b可抑制CD4+T细胞中的PDCD4表达，以促进Treg扩增，从而导致结直肠ai小鼠模型对奥沙利铂医治的耐药性。另外，在结直肠ai患者中，miR-208b的高表达与较差的预后相关。安徽云序外泌体密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂。

外泌体作为一种新型细胞间信息交流的方式，在细胞间物质运输和信号交流中发挥重要作用，并参与了机体多种生理和病理过程。研究发现，外泌体中存在的非编码RNA（ncRNA）与胃ai的发生、发展和耐药性存在关联。此外，外泌体在胃ai进展和幽门螺杆菌感ran（胃ai的主要危险因素）之间的相互作用中起着至关重要的作用。因此，靶向外泌体或这些外泌体衍生的ncRNAs可能是一种医治胃ai的新方法。来自北京大学tumour医院的邢晓芳、季加孚、李子禹等人在MolecularCancer上发表综述文章，总结了外泌体的起源和特征以及外泌体ncRNA和胃ai之间的详细联系，指出靶向外泌体极其衍生ncRNA在诊断、医治胃ai方面具有广阔前景。

外泌体的分离方法包括差速离心法、ExoQuick外泌体快速提取试剂盒法、免疫亲和沉降法、蔗糖密度梯度-超速离心法和微流体分离法等。其中差速离心法是较常用的外泌体分离方法，即通过较低的离心速度从培养基中分离出颗粒较大的物质，然后外泌体、小胞外囊泡及蛋白质再以非常高的速度(100000×g)离心产生沉淀。因此，差速离心只能富集而不能纯化外泌体。富集的外泌体、小胞外囊泡及蛋白质通过生物化学、质谱或电子显微镜等相关技术进行物理、化学及生物表征，从而得到进一步鉴别。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。

2015年JHuan等人证实了急性髓细胞白血病（AML）的外泌体在白血病的骨髓微环境中具有抑制造血干细胞的功能。同年WANGY等人发现诱导多能干(iPS)细胞的外泌体可以在心肌细胞受到急性心肌缺血（MIR）影响时，给心肌细胞传送保护信号。目前有关外泌体的研究，主要集中在外泌体颗粒的提取、纯化和内容物分析上。其中，外泌体的粒径表征和浓度信息是极为重要的参数。人体中几乎所有类型的细胞都能产生外泌体，它普遍存在于组织细胞间隙及体液中。以往认为外泌体属于细胞“垃圾”，且因此低估它的重要作用。虽然外泌体在30多年前被发现，但是直到较近才开始意识到其重要性。云序生物人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体，外泌体普遍存在并分布于各种体液中。广西测序外泌体LncRNA测序

外泌体大小均一， 直径在40~100 nm。北京技术外泌体文章

H.Valadi等发现，细胞之间可以通过外泌体中的RNA来交换遗传物质。这意味着细胞可以通过外泌体影响另外一个细胞，甚至可以把自己的基因强加给另外一个细胞。研究人员逐渐对小小的外泌体产生了极大的好奇。他们发现，tumour细胞的外泌体与正常细胞的外泌体之间存在差异，tumour的外泌体会促进tumour的生长和转移，tumour周围组织细胞分泌的外泌体具备杀伤tumour细胞的能力，等等。2013年的诺贝尔生理或医学奖颁给了三位科学家，他们分别是美国科学家James E. Rothman和Randy W. Schekman，德国科学家Thomas C. Südhof，以表彰他们发现细胞内部囊泡（外泌体等）运输调控机制。使外泌体的研究达到全新的高度。就外泌体的研究方向而言，干细胞、免疫、microRNA、靶向给药、ai症的诊断及医治等都是热门研究领域。北京技术外泌体文章

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