本发明的特征在于:应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测,主要步骤如下。(1)将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀。(2)将步骤(1)中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,至沉淀完全散开,然后5000g离心30s,弃上清。(口腔拭子样本则无需进行此步骤)。(3)向步骤(2)所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1~2min;室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的基因组DNA;所述的核酸释放剂组成为20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺;所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2~图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。口腔拭子一旦有破损记得联系经销商或者厂商,及时沟通退换。辽宁医疗口腔拭子全国发货
一旦发现包装破损则立刻丢弃,不得使用。口腔DNA海绵拭子
【使用期限】:一旦拆封后应立即使用,未拆封前推荐在出厂后3年内使用
【生产批号】:见包装袋
【生产厂家】:深圳市华晨阳科技有限公司ISO13485:2012是欧盟使用的标准,当前国际通用的标准仍然是ISO13485:2003版,2012版的升级相比ISO13485:2003变化有如下几点,ISO13485:2012年在标准的前言部分做了适当的调整,主要是用词的变更,以及一些适用范围细节的修改,在附录部分做了较大的改动,修改了ANNEXZA,ANNEXZB以及ANNEXZC这三个目录,增加了ISO13485与三个医疗器械指令之间的关系。此次的升级2012版本值得期待,该标准仍然只是在欧盟所推行,国内仍然使用ISO13485:2003。0标签:DNA海绵拭子i一次性无菌海绵拭子口腔基因检测拭子无菌海绵棉签海绵拭子。 福建鼻咽口腔拭子源头厂家口腔拭子取样**0分钟,不要吃东西,吸YAN,饮酒等。
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产品主要用于临床和工业方面采集和保存培养微生物及分子生物学用的细菌和病菌。深圳市华晨阳科技有限公司公司产品种类多、质量高。
保质期:3年保存条件:常温规格:1000支/箱
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货号产品描述包装155C无菌塑料棒拭子(带管包装)1000支/箱167KS01无菌塑料棒拭子(独立包装)1000支/箱160C无菌铝棒拭子(带管包装)1000支/箱170KS01无菌铝棒拭子(独立包装)1000支/箱164KS01无菌塑料棒涤纶纤维拭子(独立包装)1000支/箱200CS01无菌3ml吸管1支/包500包/箱200CS05无菌3ml吸管5支/包100包/箱200CS10无菌3ml吸管10支/包50包/箱201CS01无菌1ml吸管1支/包500包/箱201CS05无菌1ml吸管5支/包100包/箱201CS10无菌1ml吸管10支/包50包/箱305C16X100mm采样管,3mlUTM培养基。
所有反应孔背景信号好、Ct值都在19~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型,说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测,每份样本平行三次,结果分别如图2、图3、图4、图5所示,由图可见,每个样本的平行实验,其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂(20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺),涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对,具体操作过程:将取血管颠倒混匀数次,吸取200μL血液于。如果您选择匿名检测,请在姓名处填写送检登记表上的条形码编号。
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口腔拭子采样时要让拭子头部和口腔黏膜充分接触,然后重复一分钟。辽宁医疗口腔拭子全国发货
下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增,方法如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂,涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①:50℃,2min,循环1次。步骤②:95℃,5min,循环1次。步骤③:95℃15s,55℃30s(收集荧光),循环40次。结果分析:平行扩增的荧光定量PCR反应中,阴性对照无扩增,说明反应体系正常,无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本,然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测,结果如图1所示。 辽宁医疗口腔拭子全国发货
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