培养基制备的基本方法:1.培养基配方的选定:同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外.一般均应尽量收集有关资料.加以比较核对。2、培养基的制备记录,每次制备培养基均应有记录,包括培养推各称,配方及其来源.和各种成份的牌号。较终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等,记录应复制一份。3.培养基成分的称取。培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱.较好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。5、培养塞pH的初步调整培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正。培养基根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。江苏大容量 培养基制备仪
培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。江西培养基消毒 培养基制备仪控制培养基的条件,控制培养基的pH配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。
制作牛肉膏蛋白胨固体培养基:(1)方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(2)倒平板操作的步骤:①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶,将瓶口迅速通过火焰。③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。④等待平板冷却凝固,大约需5~10min。然后,将平板倒过来放置,使培养皿盖在下、皿底在上。倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源(生长因子)等。(1)碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。(2)氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。
杀毒灭菌方式主要有三种类型:⑴高压蒸汽灭菌方式,此方法可用于大多数耐热培养基。⑵煮沸灭菌法方式:此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。⑶过滤除菌方式:过滤除菌,采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。培养基倒入平板:将灭菌溶化的培养基冷却至五十度后,倒入无菌干燥的培养皿中。微生物培养基制备的温度不能太高,否则培养皿内盖容易形成过多的冷凝水。培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基。中国香港培养基灭菌 培养基制备仪
培养平板培养基是被用于获得微生物纯培养的很常用的固体培养基形式。江苏大容量 培养基制备仪
培养基制备的九个步骤关注要点:步骤一:称取数量:用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量,然后用电子天平准确称取重量。步骤二:培养基溶化:将培养基纳入烧杯容器中,加小适量的水,缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂,则不需要对培养基加热;相反含有琼脂,就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。步骤三:调培养基pH:虽然培养基中含有缓冲物质,可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内,但如果配制的培养基不能要求,则必须进行必要的调整。如果您有校准过的pH计,则可以使用pH计。步骤四:培养基过滤:如果对配制的培养基没有特殊要求,这一步可以省略。步骤五:培养基分装:准备好的培养基根据用途不同分为烧瓶、试管等容器,分装试管量大采用自动分液器,分装试管量小,可以用漏斗分液。确定这批培养基的较终pH值。步骤六:培养基灭菌处理:分装完成的培养基应马上灭菌。江苏大容量 培养基制备仪
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