Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。 M199全称Medium 199,即培养基199,是Morgan等在1950年设计的,初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。上海医用细胞培养基
Fischer’s培养基是GlenFischer在美国国家**研究所设计的,初用于小鼠白血病细胞的培养。现在主要用于造血细胞的培养,如淋巴母细胞和淋巴细胞的培养。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。注意事项本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;为保持本产品的较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和***。上海医用细胞培养基William’s E培养基主要用于大鼠肝上皮细胞的长期培养,也可用于其他哺乳动物的肝细胞培养。
细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。
CMRL培养基是由康诺特医学研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)设计出来的,初用于L细胞(Earle)的无血清培养。CMRL培养基添加马血清或小牛血清后,特别适用于猴肾细胞的克隆培养以及其他哺乳动物细胞系的培养。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。注意事项本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;为保持本产品的比较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和。大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基初是为淋巴细胞培养专门设计的。
III)细胞系的大规模连续培养。该培养基主要用于培养和维护鳞翅类衍生细胞系和扩增这些细胞系的病毒。IPL-41培养基基础也以用于无血清夜蛾细胞的杆状病毒重组蛋白表达。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。Ham’sF-10营养混合物(Ham’sF-10Nutrient Mixture)是由Ham针对CHO细胞无血清培养设计出的一种培养基。山西医疗细胞培养基供应商家
MEM α培养基是一种改良的MEM培养基,与MEM培养基相比MEM α培养基营养更为丰富。上海医用细胞培养基
Ham’sF-12营养混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10营养混合物为基础设计而成的,**初用于CHO细胞的无血清培养。Ham’sF-12常作为无血清培养的基础培养液,在低血清含量下时,特别适合单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也广泛应用于*细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等。此外,Ham’sF-12与DMEM等体积混合后,得到的DMEM/F12培养基营养更为丰富,使用更为较广。NEAA(非必须氨基酸),是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。 上海医用细胞培养基
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