基础培养基各种微生物的营养要求虽不相同,但多数微生物需要的基本营养物质相同。按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是很常用的基础培养基,它可作为一些特殊培养基的基本成分,再根据某种微生物的特殊要求,在基础培养基中添加所需营养物质。根据培养基的特殊用途可分为基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基等。基础培养基:含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐,调节pH7.2~7.6,经灭菌处理后,即为基础液体培养基;如再加入0.3%~0.5%的琼脂,则为基础半固体培养基;加入1%~2%的琼脂,则为基础固体培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是很常用的基础培养基,它可作为一些特殊培养基的基本成分,再根据某种微生物的特殊要求,在基础培养基中添加所需营养物质。液体培养基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。青海琼脂培养基 培养基制备器
培养基的制备:(1)称量:根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;(3)分装:根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5(需根据试管的大小而定).液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.(4)塞硅胶塞:装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.(5)包装:三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水(稀释水)装入试管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸馏水(稀释水)装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.(3)量取240ml蒸馏水(稀释水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。吉林培养基灭菌 培养基制备器制备培养基的操作要点:固体培养基在实际中用得十分普遍。
平板的制备和储存:倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少为3mm(直径90mm的平皿,通常要加入18mL〜20mL琼脂培养基)。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存,或者培养时间超过48h或培养温度高于40℃,则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用或存放于暗处和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培养基成分的改变。在平板底部或侧边做好标记,标记的内容包括名称、制备日期和(或)有效期。也可使用适宜的培养基编码系统进行标记。将倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延长储存期限。为了避免冷凝水的产生,平板应冷却后再装入袋中。储存前不要对培养基表面进行干燥处理。对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
培养基的配置应该注意的几大步骤:常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂。
自动培养基制备分装器是一种用于农学领域的分析仪器:可制备从1升到10升的培养基。高效电加热器,方便腔体的清洗。自带磁力搅拌装置,每分钟50-200转可调。温度控制范围:70℃到122℃。微处理器控制温度精度为0.1度,显示温度精度0.1度。机器有培养基灭菌模式、巧克力平板模式、水浴锅模式及高压锅模式。具有压力维持系统。分装机很大一次性载装量为540个皿,分装体积1-99ml可选,分装精度1%,分装速度不低于900块/小时,分装量不低于500毫升/分钟。能自动调整适应公差范围内的平皿。分装主机具有变径功能。通过选配件可快速转换为全自动试管分装系统。可以自动识别并跳过不符合分装的平皿,不影响整机分装过程的连续性。低速,普通,震动平铺三种分装模式。自带2个RS232接口。具有自带清洗程序。分装系统可编程操作16个程序。分装流速0.6mL/min-5L/min,分装误差小于1%。可设置多种工作方式,单次分装量0.1mL-9999mL。可设置为间隔分装,暂停时间0.1-10秒可选,并可设定分装次数。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。北京Systec培养基制备器
培养基的实验室制备:正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。青海琼脂培养基 培养基制备器
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、灭菌30min为好。青海琼脂培养基 培养基制备器
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【详情】培养基配制--容器和水:配制培养基所用的容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器,培养基配制所用的容器...
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