配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。广西自动搅拌培养基制备仪
培养基制备仪:培养基的种类繁多,但制备的方法大同小异,一般可分为6个步骤:用水、称量、溶解复水、灭菌、pH测定、保存。1、必须选用专门纯净水或者经消毒过后的无菌水。2、培养基进行复水的容器不得用铜锅或铁锅,放置离子混入培养基中,影响微生物的生长。3、容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍,预防出现溢出情况。4、在对培养基进行加热时,若培养基内含有琼脂粉成分,则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热,预防发生局部烧焦及沸腾溢出。5、琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热,较多只能加热两次,第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。6、而当对培养基实施灭菌时,需严格按照说明规范操作。但是也不能盲目按照说明的时间进行,需结合实际情况,合理调节灭菌时间,防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。广西自动搅拌培养基制备仪培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。
培养基的类别按照培养基的物理状态分:培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。(1)古体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。古体培养基常月于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养,目标菌应呈现良好生长,并有典型的菌落外观、大小和形态,非目标菌应是微弱生长或无生长。
培养基的使用:1.琼脂培养基的融化:将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。
固体培养基的制作步骤:1、首先我们要准备好一个装有1000ml的烧杯,然后在准备好的杯中在放入500ml的蒸馏水,在将牛肉膏和蛋白胨、氯化钠这些都溶解在水中。2、其次我们在调节PH值,调节时需要百分之10的氢氧化钠溶液,将PH值调到7.2,在此也要定容到1000ml,较后在将这些液体都分别放入10个锥形瓶内,每一瓶都装100ml。3、然后我们再把剪碎的琼脂放进五个锥形瓶里,在给每个锥形瓶中放入2.4克,然后在把这十个锥形瓶瓶口都弄上棉花塞,瓶子也要弄上报纸。4、较后我们就可以将刚才所包扎好的一些锥形瓶放入灭菌锅里,灭菌时一定要记得灭菌十分钟,十分钟到了之后,在将锥形瓶拿出来,冷却之后就成了固体培养基了。注意事项:倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟,要看好时间。注意事项:倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟,要看好时间。半固体培养基,指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。北京琼脂培养基制备仪
液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点。广西自动搅拌培养基制备仪
制作牛肉膏蛋白胨固体培养基:(1)方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(2)倒平板操作的步骤:①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶,将瓶口迅速通过火焰。③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。④等待平板冷却凝固,大约需5~10min。然后,将平板倒过来放置,使培养皿盖在下、皿底在上。倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。广西自动搅拌培养基制备仪
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