湿热灭菌：湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行，高压灭菌一般采用121℃±3℃灭菌15min，具体培养基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。培养基体积不应超过1000mL，否则灭菌时可能会造成过度加热。所有的操作应按照标准或使用说明的规定进行。灭菌效果的控制是关键问题。加热后采用适当的方式冷却，以防加热过度。这对于大容量和敏感培养基十分重要，例如含有煌绿的培养基。过滤除菌：过滤除菌可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2μm的无菌设备和滤膜。消毒过滤设备的各个部分或使用预先消毒的设备。一些滤膜上附着有蛋白质或其他物质（如物品），为了达到有效过滤，应事先将滤膜用无菌水润湿。固体培养基根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。湖南培养基制备器品牌
培养基pH的初步调正：因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培养基各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。例如，牛肉浸液约可降低pH0.2，而肠浸液pH却会有明显的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的较终PH，保证培养基的质量。PH调整后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。培养基的过滤澄清：液体培养基必须澄清，琼脂培养基也应透明无明显沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应折叠成折扇或漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。中国台湾培养基制备器供应商调节氧化还原电位(Eh) 各种微生物对培养基的Eh要求不同。
在制备培养基时，通常要考虑以下因素：1.缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。2.渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止3.粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响，在多数情况下，对细胞生长没有什么影响。在搅拌条件下，用羧甲基纤维素增加培养基的粘度，可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要。
高压灭菌造成培养基结焦焦化问题：在实验过程中，检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。微生物认为造成这种现象是：控制培养基在容器中不要超过百分之八十，避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长（115-116度）二十分钟即可，温度不超过121度，而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。贮存：培养基在30℃下放置1天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。
培养基中血清的质量标准：血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求：牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。对细胞有良好的支持繁殖作用。培养基的过滤澄清液体培养基必须澄清，琼脂培养基也应透明无明显沉淀。重庆琼脂培养基 培养基制备器
培养基根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基。湖南培养基制备器品牌
培养基配制后一般都有沉渣或混浊出现医学，需过滤成清晰透明后方可使用，常用的过滤方法如下：1.液体培养基：液体培养基必须清晰，以便观察细菌的生长情况，常用滤纸过滤，亦可在加热前加入用水稀释的鸡蛋白（1000ml培养基用1个鸡蛋白）在100℃加热后保持60～70℃，40～60分钟，使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀，然后再用虹吸法吸出上清液或以滤纸过滤。2.固体培养基：如系琼脂培养基，于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤；亦可用自然沉淀法，即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷容器内，以高压（103.43kPa）蒸汽融化15分钟后，静置高压锅内过夜，次日将琼脂倾出，用刀将底部沉渣切去，再融化即可收清晰的琼脂培养基。湖南培养基制备器品牌
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