糖原染色(过碘酸-雪夫反应)原理多糖中乙二醇基经过碘酸氧化成二醛基与无色品红结合,形成紫红色化合物。沉积于含糖原的胞浆中。结果:胞浆中出现弥散状,颗粒状,块状红色为阳性。无红色颗粒为阴性_x000c_临床意义1、正常血细胞的染色反应粒系:原粒细胞糖原含量很低,随着细胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟阶段糖原含量十分丰富。淋巴细胞:糖原常凝聚成颗粒或块状。巨核细胞-血小板系统:PAS反应呈粗大的紫色颗粒或团块。正常红系:阴性。对疾病诊断的意义白血病类型的鉴别:急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阴性或弱阳性反应,以弥散性为主;急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞多呈粗颗粒、块状阳性反应故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。天津咨询糖原染色试剂盒报价
PAS染色试剂配制及染色方法:1.材料与方1.1实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例,均来自我室实验材料。1.2主要试剂1.2.1AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液,其配方:无水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3过碘酸溶液0.5g过碘酸(HIO)溶于100mL蒸馏水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:过碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸钠0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4无色品红液(Schiff氏液)在三角烧内加入蒸馏水500mL,煮沸后,在保持微沸的情况下,加入碱性品红2.5g,并不断摇动约5min(勿使之沸腾),使碱性品红彻底溶解(溶解液为深红色)。冷却到50℃时,过滤,加入1N盐酸50mL,再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g,塞住瓶口,摇动容器以充分混合(此时颜色明显变淡),然后避光放置或冰箱内24h北京如何使用糖原染色试剂盒厂家供应切取材料时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤。
GUS染色步骤:1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次,至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察,白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注:用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如,拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。
可以通过pas染色计算糖原含量吗:PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用来显示糖元和其它多糖物质. 具体现象例举:阳性反应,胞浆呈红色,阴性反应,胞浆呈无色;在正常血片中RBC不染色; PLT染成深红色;中性粒细胞胞浆染成红色或深红色,有些细胞有阳性颗粒;单核细胞的胞浆染成淡红色,可含有细小或粗大阳性颗粒;少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒;正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色;巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色. 颜色深浅与浓度相关切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。
糖原染色:1、概况PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。2、原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。3、应用随着医学实验技术的发展,糖原染色应用的范围更加普遍,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究,糖尿病的诊断和研究,用于某些的诊断等。帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。湖南哪家生产糖原染色试剂盒厂家批发价
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糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用,一般可用3个月,变黄则失效。天津咨询糖原染色试剂盒报价
注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。浙江糖原...