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胎牛血清基本参数
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因为制作工艺成熟和产量大的原因,实验室常备血清一般都为牛血清。而牛血清种类也因适合培养不同种类的细胞分很多种了,同属于牛血清为什么它们价格却有天壤之别。我们就拿市面上应用较为广的胎牛血清和新生牛血清为例。除了生产成本和供应来源不一样外,两种血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可较为大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。二者的成分也很不一样。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,还含有丰富的胚胎生长促进因子以及各种还未完全鉴定的成分,可满足所培养细胞的特殊的代谢需求。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等。韶关标准级胎牛血清厂家

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胎牛血清和新生牛血清的区别是什么?取血年龄不同:牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得来的胎牛。国产胎牛血清(并无明确定义,但通常以此称)的指的是出生4-6小时,且未进行哺乳进食的牛,有时还称作国产新生牛。 新生牛血清指的是出生14天-3个月进行取血的牛。成年牛血清指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。组分与比例不同:这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。用途与用法不同:根据细胞所需生长条件可确定。韶关标准级胎牛血清厂家胎牛血清的蛋白质含量:3.5%~5.0%( w/v);血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。

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避免产生沉淀物:请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。若血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

如何避免血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

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胎牛血清的整个生产流程可以分为原料采集,原料加工以及冷链运输。原料采集作为胎牛血清整个生产流程的第一步也是关键的一步,对产品的较为终质量起了决定性的影响。采集过程一般要求在各个血源地相关部门认证的农场现场采集胎牛血浆,以确保采集对象为兽医监管下经临床检查为健康的动物。同时,整个采集的过程还需要在无菌环境下进行,一些很好的供应商甚至提供了全封闭的采集系统,彻底避免血清与空气的接触,这样较为终的血清产品内的内有毒的以及血红蛋白等成分才会维持在一个极低的水平,确保了获取的原始血浆质量。采集到了很好的原料,下一步就是对采集到的原料进行加工。原料到加工往往会涉及运输的过程,由于生物制品需要冷链运输的特殊性,在原产地直接对原料进行加工是较为理想的情况,这样可以较为大程度地避免交叉污染。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛。韶关标准级胎牛血清厂家

大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。韶关标准级胎牛血清厂家

国际上流行的【血清融化三步法】可较为大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。关于胎牛血清的灭活:真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。胎牛血清的浓度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成完全培养基。曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体很好浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。韶关标准级胎牛血清厂家

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