紫外可见分光光度计有着较长的历史,其主要理论框架早已建立,制作技术相对成熟。目前,紫外可见分光光度计在追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代紫外可见分光光度计新的增长点。紫外可见分光光度计的发展历史分光光度法始于牛顿。早在1665年牛顿做了一个实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔,在室内形成很细的太阳光束,该光束经棱镜色散后,在墙壁上呈现红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫的色带。这色带就称为“光谱”。1815年夫琅和费仔细观察了太阳光谱,发现太阳光谱中有600多条暗线,并且对主要的8条暗线标以A、B、C、D…H的符号。这就是人们Z早知道的吸收光谱线,被称为“夫琅和费线”。但当时对这些线还不能作出正确的解释。1859年本生和基尔霍夫发现由食盐发出的黄色谱线的波长和“夫琅和费线”中的D线波长完全一致,才知一种物质所发射的光波长(或频率),与它所能吸收的波长(或频率)是一致的。1862年密勒应用石英摄谱仪测定了一百多种物质的紫外吸收光谱。他把光谱图表从可见区扩展到了紫外区,并指出:吸收光谱不只与组成物质的基团质有关。接着,哈托莱和贝利等人,又研究了各种溶液对不同波段的截止波长。上海元析光度计质量保证。辽宁国产光度计操作
1.设计原理紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯.见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池,紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度,将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是采用新型单片机技术,开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描。湖南光谱仪光度计使用光度计的制作步骤详解。
在仪器改变测试波长和测试一段时间后可通过按0%键和100%/0A键对仪器进行调零和调满度、吸光度。(5)显示方式的选择【相关实验】邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量报告实验目的邻二氮菲吸光光度法测定铁的含量;熟悉722N型分光光度计的原理和操作。实验原理邻二氮菲吸光光度法是测定铁含量的常用方法。在PH为2~9的溶液中,Fe2+的显色剂邻二氮菲形成稳定的橘红色络合物,该络合物在508nm波长处有**大吸收。为了消除Fe2+的副反应及其他因素的影响,在微酸溶液进行,且用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+。吸光光度法定量分析的依据是朗伯比尔定律A=Ɛbc,当液层厚度b一定时A=Kc,吸光光度法定量分析的方法有直接比较法和标准曲线法,这个实验用标准曲线法。在标准曲线上查出试液中铁的含量,按下式求出原始待测溶液中铁的含量(ρ表示溶液中铁的含量,mg/L)ρFe,原始待测溶液=ρFe,标准曲线查得50/10实验步骤1、取出容量瓶和移液管,用蒸馏水清洗容量瓶并用相应的溶液润洗移液管;2、在6个容量瓶中用刻度移液管分别加入,、、、、、,5mLHAc-NaAc缓冲溶液,1mL10%盐酸羟胺溶液及,用水定容。将其分别对应编号为1、2、3、4、5、6号。
用小试管cuvette装样品容量一般从1μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。另外一个值得考虑的因素是数据的较终使用。各实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。光度计的应用场景有什么。
5、WFZ800-DA、756型等分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6、放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下:分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。典型故障及其排除方法1、仪器不能调零。可能原因:a.光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。b.透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮。c.仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥。上海元析光度计值得推荐。湖南紫外可见分光光度计教程
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在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下:分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在;若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。辽宁国产光度计操作