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细胞冻存注意事项：离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。无血清快速细胞冻存液：含动物来源的血清成分，能够有效提高细胞冻存活率和复苏活力。宁波正规无血清细胞冻存液服务电话

细胞冻存，我们应该注意哪些事项：1、液氮内的细胞冻存较长时间不要超过半年，冻存在液氮中的细胞应一段时间内进行更替。一个细胞系在培养一个月后，可复苏一管新的细胞确保其质量没有发生太大变化，传代几次后，再冻存留种。2、细胞复苏时，为保证获得较高的存活率和接种率，应尽可能的快速完成复苏，以避免在升温过程中细胞内部晶体的产生。书面介绍的复苏温度是37℃-42℃，但是本人在实际操作中发现40℃环境下复苏效果较好。3.复苏时使用的培养基和冻存时使用的培养基中的血清尽量保证同一批次。正规无血清细胞冻存液单价清洗细胞，充分洗净残留冻存液。

无血清细胞冻存液：细胞冻存及复苏是细胞培养技术中的重要技术，细胞冻存是细胞长期保存的重要手段。细胞冻存液，作为细胞冻存时必须使用的一种溶液，其作用是将需要冻存的细胞悬浮于冻存液，供给细胞生命代谢所必须的营养物质，同时可以防止或减少冷冻冰晶对细胞的损伤作用。在现有技术中，一般使用培养基、血清和二甲亚砜(DMSO)按照一定比例混合的方法来冻存细胞，DMSO用量为10％，过低的DMSO浓度会导致冻存效果欠佳，但高浓度的DMSO有较大毒性，会对细胞体造成伤害；且传统冻存液配方中所使用的血清成本高，增加动物病原污染的可能性。此外，有研究表明长期与胎牛血清接触的细胞会对溶液介质中的胎牛血清发生内吞，内吞胎牛血清后的间充质干细胞有可能发生某些蛋白表达的变化，应用于人体后可发生异种动物蛋白引起的免疫反应，不能直接用于临床输注。因此，利用含有血清的冻存液冻存的细胞会给临床使用带来一定的风险。

无血清细胞冻存液与含血清细胞冻存液对比：传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，统称为含血清细胞冻存液。含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），较后才移至液氮罐中进行长期的储存。可见，含血清细胞冻存液冻存细胞时遇到的问题：1.冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液，此步可省略)。2.需要程序降温（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步骤繁琐，耗时耗力。3.含血清，细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高。4.血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异。5.需液氮冻存，且不能原位（如孔板）冻存。无血清细胞冻存液的优势：无需程序降温，可直接放置-80℃冻存，操作简单。

无血清细胞冻存液，通用于人和各种动物细胞株。特别配方（主要成分为DMSO和氨基酸）具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染，确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。产品特色：不含动物源成分，病毒、霉菌和支原体等污染可能性低，各批产品之间有更高的产品质量一致性。成分明确，无批次差异。可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省力、省钱）。独特配方有效提高细胞冻存存活率及复苏率。即用型，无需现配，即开即用。通用型，适用于冻存各种细胞系，原代细胞。可微量，原位冻存，例如杂交瘤细胞的冻存，省时高效。存储条件：储存于4℃以下,质量保障期从产品的生产日期起，为期两年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能-20℃冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将产品分装成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。无血清细胞冻存液用途：无血清细胞冻存液用于造血干细胞、间充质干细胞等干细胞的储存。无锡郑州无血清细胞冻存液

无血清细胞冻存液使用方法：将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。宁波正规无血清细胞冻存液服务电话

无血清细胞冻存液，通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白，能减少各类细菌、霉菌和支原体等的污染，确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。高安全性，完全使用医药品等级原料进行生产，不含动物成分，细菌、霉菌和支原体等污染可能性低，各批产品之间有更高的产品质量一致性。2.细胞存活率高，无批次差异。3.完全冻存液配方，可直接使用，方便简捷，可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省力、省钱）。无血清细胞，无血清干细胞及MSC冻存液储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起，为期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将100ml产品分装小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。宁波正规无血清细胞冻存液服务电话