编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示,根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中,用~5ug/ml的6点和空白样品(蒸馏水)创建,得到了线性度良好的标准曲线(相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中,噪声的影响相对较大,导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。紫外可见分光光度计的钨灯光源发出400~760nm波长的光谱。安徽uv分光光度计厂家
并更换干燥剂。d.电路故障。解决方法:检修电路。2、仪器不能调“100%”。可能原因:a.光能量不够。解决方法:增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)。b.比色皿架未落位。解决方法:调整比色皿架使其落位。c.光电转换部分老化。解决方法:更换部件。d.电路故障。解决方法:调修电路。3、测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因:a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解决方法:用擦镜纸擦干净比色皿表面,然后将其安放在比色槽的左边,上面用定位夹定位。b.电路故障(电压、光电接收、放大电路)。解决方法:送修。4、数显不稳。可能原因:a.预热时间不够。解决方法:延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因,长时间处于工作状态时,也会工作不稳)。b.光电管内的干燥剂失效,使微电流放大器受潮。解决方法:烘烤电路,并更换或烘烤干燥剂。c.环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法:改善工作环境。d.光电管、电路等其它原因。小结综上所述,以下几个问题应引起仪器操作人员注意:1、比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,严重影响分析结果。贵州分光分光光度计品牌任何紫外可见分光光度计,必须要有相应的光电转换系统。
PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品的固定物来满足各种改变需要。
以免影响光效率。5、WFZ800-DA、756型等分光光度计,由于其光电接收装置为光电倍增管,它本身的特点是放大倍数大,因而可以用于检测微弱光电信号,而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移,灵敏度下降。针对其上述特点,在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下,因此在预热时,应打开比色皿盖或使用挡光杆,避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。6、放大器灵敏度换挡后,必须重新调零。7、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用,否则将使测试结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下:分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,石英比色杯;220nm、700nm装蒸馏水,玻璃比色杯:700nm处装蒸馏水,将某一个池的透射比值调至100%,测量其他各池的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。典型故障及其排除方法1、仪器不能调零。可能原因:a.光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。b.透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮。c.仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥。超微量分光光度计占据实验室空间体积比传统分光光度计小很多!
首先,应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜,就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致,还可能使入射光不能全部通过样品池,导致测试比准确度不符合要求。其次,应保证每次测试时,比色皿架推拉到位。若不到位,将影响到测试值的重复性或准确度。***,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命。2、干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致:a.数显不稳、无法调“0”点或“100%”点(电路或光电管受潮)。b.反射镜发霉或沾污,影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因,分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3、仪器的工作环境应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。文章来源网络,转载只为知识分享,如涉及版权及稿费问题,请与我联系END食品伙伴网公众号矩阵请点击小图,长按识别二维码食品伙伴网食品论坛食品质量管理食品标法圈食品伙伴网订阅号食品实验室服务国际食品食学宝。超微量分光光度计显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值。青海紫外可见分光分光光度计操作
超微量分光光度计的定量分析包括单组分分析,多组分分析,有机元素分析,无机元素分析等.安徽uv分光光度计厂家
UV-8000A型双光束紫外可见分光光度计仪器特点和功能;采用精选检测器、氘灯、钨灯等关键元器件,仪器经久耐用;精选光栅的使用不仅提高了紫外区的能量,同时使仪器具有低杂散光;采用获得的双光路光学系统(实用新型号ZL20132),双检测器;;采用320*240位点阵式高亮6”液晶显示器,显示清晰,;主机可自主完成光度测量、定量测量、光谱扫描、动力学、DNA/蛋白质测试,多波长测试及数据打印等功能;采用光学系统悬架式设计,整体光路固定在16mm厚的切削铝制无变形基座上,底板的变形和外界的震动对光学系统不产生影响,从而提高仪器稳定性;考虑不同用户的使用习惯,本系列仪器都标配元析公司光谱扫描软件,联机操作时,除能实现主机测试功能外,还可实现较多的数据处理功能。安徽uv分光光度计厂家
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