细胞RNA提取的方法:异丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以见到侧壁沉淀,轻轻吸弃上清。向EP管中加入75%酒精洗涤沉淀,帮助分离剩余的有机试剂(剩余有机试剂过多会影响OD值和PCR反应),轻弹沉淀,使其浮在酒精,静置1-2min,让酒精充分接触沉淀,充分溶解有机试剂,然后4度离心5min。轻轻吸弃上清。将EP管再次放于离心机中瞬时离心,弃掉管壁残余液体。然后将EP管置于超净台中干燥5-10min.。注意RNA样品不要过于干燥,否则很难溶解。加入50ulDEPC处理水,震荡充分溶解沉淀。测量RNA浓度。将RNA保存于-80度。总RNA提取试剂:适用于植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。唐山RNA提取试剂进货价
细菌RNA快速提取试剂盒:该产品基于独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,较后低盐的RNaseFreeH2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。该产品可在30min内完成样品RNA的提取,提取的总RNA完整性好,无蛋白和基因组DNA污染。注意事项:初次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。所有离心操作步骤,均可在室温(15-25℃)下进行。提取细菌RNA需先配制加了溶菌酶或者Lysostaphin的TE(10mMTris-HCl,1mMEDTA),TE中已加入溶菌酶或者Lysostaphin,浓度为1mg/mL。南京正规RNA提取试剂销售厂家RNA提取试剂注意事项:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
植物RNA快速提取试剂盒:1.固体组织破碎设备。可用下列装置之一:1)玻璃匀浆器。泡酸清洁,用高压灭菌蒸馏水洗涤数次。2)研钵。适用于液氮冻存组织的研磨,清洗方法同玻璃匀浆器。3)高速机械匀浆器(Polytron,Tekmar或类似产品),打开开关,在蒸馏水中清洗分散器头数次。2.高压蒸汽30分钟消毒一次性吸头离心管。RNA沉淀溶解之后,应严格使用高压消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染环境下工作,在裂解步骤可使用未高压但洁净的一次性吸头和离心管,但光推荐在紧急情况下这样做。3.普通双蒸水,高压消毒20分钟。用于冲洗器皿,配制琼脂糖凝胶和电泳用缓冲液。DEPC处理的双蒸水。加DEPC到水中至终浓度为0.01%v/v,室温过夜,高压消毒30分钟。用于溶解RNA,配制TE缓冲液和75%乙醇。4.湿冰。在冰上进行操作有助于减少RNA降解。5.其它用品。电泳槽,双蒸水冲洗。离心机和加样器,无需处理。6.戴手套。注意某些实验如提取质粒DNA如使用极大量RNA酶,为防污染,须较全仔细清洗实验器具和实验区域。
与DNA不同,RNA一般为单链长分子,不形成双螺旋结构,但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同,不过除了A-U、G-C配对外,G-U也可以配对。在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。血浆/血清RNA提取试剂盒:普通植物总RNA提取试剂盒:采用进口硅基质膜制作的总RNA吸附柱。
RNA稳定方法:1.在裂解缓冲液中立即溶解,使RNase失活。然后样品可以立即处理或冷冻保存。2.浸泡在稳定试剂中(如DNA/RNAShield),使核酸酶失活,并在环境温度下长时间保护核酸。这对正在实地收集样本或处理珍贵的病人样本(例如组织活检、全血等)的研究人员特别有帮助。确保样品完全溶解:在RNA提取过程中,较大限度地提高RNA产量和质量的较佳方法是保证样品的完全裂解。然而,并不是所有的样本都对相同的裂解方案敏感。例如,血细胞(如淋巴细胞、PBMCs等)和微生物细胞往往更难以有效地溶解。光光添加基于洗涤剂的裂解缓冲液可能并不总是足够的。为了提高裂解效果,可以将裂解缓冲液与机械裂解步骤(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶K、溶菌酶等)。RNA提取试剂:TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。珠海RNA提取试剂销售厂家
植物RNA提取试剂产品特点:RNA纯度更高,无杂质残留,特别适合于对纯度要求很高的下游实验。唐山RNA提取试剂进货价
RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示,公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量~唐山RNA提取试剂进货价
RNA提取关键点病菌RNA在提取后也仍然具有传染性,在提取时,实验人员需要佩戴口罩和手套等各种防护装备,以防实验室污染。而有种「自动灭活」的方法,在更加便利的同时,也能更好的保护实验人员的安全。许多样品中含有高水平的RNase,这种酶也会加速RNA的降解。为了使这种酶对降解的影响较小化,较好在采集时就稳定好样本中的RNA。这种情况下,可以在裂解缓冲液中立即进行溶解。比如可以通过TRIzol®、RNA裂解缓冲液等使RNase失活,然后再处理样本。另外,再采集样本之后马上加入DNA/RNAShield,可以快速降解掉RNase等蛋白物质。当然,DNA/RNAShield也会保证取样时微生物基因多样...