HE染色等常规染色,组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。原因:石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好,并且对抗原基本无影响。脂质染色(油红O染**odipy染色,尼罗红染色)必须做冰冻切片,不能做石蜡切片。以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,胆固醇染色。如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片,将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。组织形态结构保存完好顺序:新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片>组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片>新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片>组织-80°冷冻后直接冰冻切片。HE染色切片知识以及如何做出漂亮的切片。陕西推荐的HE染色公司
HE染色实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次。(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。(6)吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可云南专业的HE染色分析骨组织HE染色的操作流程。
HE染色观察细胞凋亡,凋亡检测中形态学方法是**直观、可靠的方法之一。对组织和各种细胞进行染色后,在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察,通过观察细胞的形态或染色的类型来判断凋亡的发生与否。细胞涂片或细胞甩片的制备:对于贴壁细胞,可将盖玻片放于培养器皿中,让培养细胞长于玻片上,然后用药物诱导细胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。对于悬浮细胞,用药物诱导细胞凋亡后,离心1000r/min收集细胞,用PBS洗2次,收集调整细胞数为1X105/ml,涂片或用离心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光学显微镜下,贴壁细胞由原来的梭形或多角形变小、变圆,核呈蓝色或蓝黑色,胞浆呈淡红色,核固缩、破碎,形成凋亡小体等。悬浮细胞,整个细胞皱缩,核固缩,破碎,形成凋亡小体,染色质颜色加深等。
HE染色是苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中**基本、使用*****的技术方法。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。HE染色取材和样本保存方式。
HE染色攻略:HE染色又称为苏木精-伊红染色,染色后组织或细胞可以借助普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围***,对组织细胞的各种成分都可着色,便于***观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整,组织有无损伤;然后看切片有无刀痕;***细胞核是否清晰可见,胞核与包浆要对比鲜明。南京英瀚斯,专业的技术提供专业的HE染色服务。新疆值得信赖的HE染色公司
HE染色是常见的病理染色,是比较基础是病理染色之一。陕西推荐的HE染色公司
HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木精的醌型结构,使组织与色素分离而褪色。经苏木精染色后,必须用0.5%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去,在进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。因此,在HE染色中分化是极为关键的一步。返蓝作用:分化之后,苏木精在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色,在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经0.5%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水出去组织切片上的酸而终止分化,再用弱碱性水(0.2%氨水)使苏木精染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。陕西推荐的HE染色公司
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